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名称：Anti asialo GM1 (Rabbit) NK细胞抑制剂， 货号：014-09801(986-10001) 规格：1ml
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NK细胞抑制剂
Anti Asialo GM1(Anti AsGM1)
本产品只能用于研究，不能用于人的治疗。
◆原理介绍
Anti Asialo GM1(Rabbit)抗血清可以减少大鼠或者小鼠来源的自然杀伤细胞（NK细胞）的活性。该抗体可以与NK细胞发生特异性结合，从而抑制NK细胞非特异性杀伤靶细胞的活性。NK细胞是一种免疫监视细胞，其靶细胞包括肿瘤细胞、同种异体移植的器官、组织等。可运用于药物筛选，器官移植，自身免疫疾病等研究。
每个产品有具体的体内外的滴定数据。
◆注射方法
小鼠-静脉注射：
10-50 μL（推荐20 μL）具体剂量由滴度和规格而定。第一次注射在4天内有效，因此两周内需要注射3-4次。
大鼠-静脉注射：
50-250 μL（小鼠剂量的4或5倍）具体剂量还须考虑大鼠的健康状况、体重和NK活性。
小鼠和大鼠-腹腔给药：
同等剂量或多于静脉注射。
◆产品信息
制备：
| 从牛脑组织里提纯的Asialo GM1与甲基化牛血清白蛋白和弗氏完全佐剂一起使用，可进行反复免疫。用含有磷酸缓冲盐水（ph7.2）的50%硫酸铵透析后，得到血清里的丙种球蛋白（Gammaglobulin）片段。 |
内容： | 含有唾液酸抗体GM1的兔血清50%硫酸铵盐析分层物 （含蛋白量约10 mg/mL）。 |
提纯法： | 50%的硫酸铵盐析后 ，用含有磷酸缓冲液的生理盐水透析，然后冻干。 |
特异性： | 作用于小鼠和大鼠的自然杀伤细胞；小鼠单核细胞（是一种不含自然杀伤细胞、骨髓、胎儿肝细胞和裸鼠脾脏巨噬细胞的肝细胞）；小鼠胎儿胸腺细胞（12日龄；生存率不断降低直到没有出现新生小鼠）（备注：如果浓度高，也能作用于成熟的T淋巴细胞） |
免疫球蛋白类型： | IgG、IgA和IgM |
重组： | 建议用蒸馏水（1 mL）。由于该产品是使用盐来进行冻干的，如果用其它溶剂如PBS或MEM，就能增加其盐浓度。 |
抗体滴度： | 通过免疫凝聚实验得出结果，抗体滴度比例约1 : 1,000 |
保存方法： | 存储在2~10℃下 |
包装规格： | 1 mL样瓶 |
形状： | 干冻品 |
◆应用案例
适用的动物模型 | 运用 |
肿瘤动物模型 | 与抗肿瘤药物混合后注入肿瘤动物模型内，研究抗肿瘤药物的作用机理。 |
肝纤维化动物模型 | 与治疗肝纤维化的药物混合后注入动物模型体内，研究抗肝纤维化药物的作用机理。 |
器官移植动物模型 | 器官移植后，会产生免疫排斥反应，机体内的免疫监视会清除”异己“的细胞和器官。可用于研究器官移植后使用的免疫抑制剂的作用机理 |
自身免疫疾病动物模型 | 研究治疗自身免疫疾病药物的作用机理。 |
干细胞动物模型 | 抑制NK细胞的活性，从而有利于干细胞动物模型的建立。 |
糖尿病动物模型 | 研究炎症与糖尿病的关系。 |
Anti Asialo GM1的抗血清可以与NK细胞（自然杀伤细胞）结合，抑制NK细胞非特异性杀伤靶细胞的活性。靶细胞包括肿瘤细胞，同种异体移植的器官、组织等。可用于药物筛选、器官移植、自身免疫疾病研究等。NK细胞属于天然免疫细胞，具有免疫监视功能。
特异性：小鼠、大鼠的NK细胞，小鼠单核细胞（不含有NK细胞的肝脏细胞，骨髓，胎儿肝脏细胞，裸鼠巨噬细胞的脾细胞），胎儿T淋巴细胞（12天）。
◆研究糖尿病的免疫治疗
据报道，抗细胞凋亡细胞因子IL-15具有促进NK细胞和T细胞（包括调节性T细胞，Tregs）存活和激活上述两种细胞活性的功能。在患有糖尿病的NOD小鼠体内反复注射IL-15。如果每天一次，注射2周，既不抑制也不加速未处理NOD小鼠患糖尿病的情况。但是NK细胞活性丧失的NOD小鼠注射IL-15可以明显减少糖尿病的发病率和延迟糖尿病发病时间，但是NK细胞活性丧失不注射IL-15的小鼠依然病发糖尿病。在用IL-15处理，NK细胞活性丧失的NOD小鼠体内产生的保护效应与CD4+CD25+ Tregs免疫抑制活性增加有关。在该项实验中，用Anti AsGM1注射小鼠，抑制NK细胞活性，导致NOD小鼠NK细胞活性缺失。
参考文献：Jinxing Xia et al., Clinica l Immunology.(2010) 134, 130–139 <全文>
◆研究败血症中NK细胞的功能
NK细胞和NKT细胞都属于天然免疫系统，但在细菌引起的败血症中这两种细胞的作用是有争议。用Anti Asialo GM1处理小鼠，成为NK细胞活性抑制的小鼠；用CD1d单抗处理小鼠，成为NKT细胞活性抑制的小鼠；同时用同型对照单抗处理小鼠，作为阴性对照。之后这些小鼠感染肺炎链球菌。分析血清和组织样品中细菌的含量，细胞因子，脾细胞凋亡率、用流式鉴定细胞，同时也分析脾细胞miRNA的表达。结果发现NK细胞活性抑制的小鼠延长了存活率。一旦NKT细胞激活抑制，与其他细胞群相比，脾脏的NK (CD3−/NK1.1+)细胞数目增加。NKT细胞活性抑制导致小鼠体内的细菌含量升高，导致血清和脾细胞IFN-γ水平升高。抗CD1d处理小鼠的脾细胞miRNA分析显示miR-200C和miR-29a下调，miR-125a-5p上调。这些变化发生在NK细胞活性抑制后。NK细胞可能与肺炎球菌肺炎的死亡率有关。抑制NKT细胞的激活导致(CD3−/NK1.1+)细胞数目增加，IFN-γ水平升高，改变脾细胞miRNA表达。
参考文献：Eirini Christaki et al., Journal of Immunology Research, Volume 2015 (2015),Article
ID 532717, 10 pages <全文>
◆研究自身免疫性疾病的NK细胞功能
NK细胞是先天免疫淋巴细胞，在先天免疫和适应性免疫中均起着关键性作用。它在小鼠体内通过NK细胞消耗 Abs，特别是抗唾液酸GM1 (ASGM1)，起关键作用。此次研究中，我们通过整个嗜碱性粒细胞群体组成如表达NK细胞群一样，来表达ASGM1以及CD49b（DX5），并通过抗ASGM1在体内通过嗜碱性粒细胞消耗的抗FcεRIαAb有效地消融。抗ASGM1介导的嗜碱性粒细胞的消耗与各种小鼠品系的NK细胞消耗有关，与NK1同种异型和MHC H2单体型（包括C57BL/6，BALB/c，C3H和小鼠A/J）无关。这些结果将嗜碱性粒细胞定义为以前未被认识到的抗ASGM1介导细胞消耗的靶标，并引起人们对嗜碱性粒细胞的关注，而不是NK细胞或除了NK细胞外对抗ASGM1处理的小鼠中观察到的某些表型。
参考文献：Nishikado H, Mukai K, Kawano Y, et al. NK cell-depletinganti-asialo GM1 antibody exhibits
a lethal off-target effect on basophils invivo[J]. The Journal of Immunology,
2011, 186(10): 5766-5771<全文>
◆研究肿瘤的免疫治疗
肿瘤的发展过程包括血管新生，肿瘤尺寸增大和肿瘤转移。使用CXCL14/BRAK (CXCL14) 转基因小鼠研究过度表达的CXC趋化因子配体14 (CXCL14) 在上述生物学现象中的作用。与野生型小鼠相比，转基因小鼠经AOM/DSS诱导的结肠血管新生的发病率显著低很多。肿瘤细胞注射到这些小鼠后，肿瘤尺寸发生变化。与野生型的相比，转基因小鼠肺中转移小瘤的数目明显少，肿瘤的尺寸也明显变小。在注射肿瘤前后注射Anti Asialo GM1减少了CXCL14在肿瘤生长方面和肿瘤转移的抑制效应，表明激活的NK细胞在CXCL14介导的抑制肿瘤生长和转移期间起重要作用。CXCL14也表达在B16黑色素瘤细胞内表明NK细胞在肿瘤转移方面的重要性。而且转基因小鼠在注射肿瘤细胞后的存活率显著增长。这些转基因小鼠没有明显的不正常，预计肿瘤抑制/预防方面CXCL14起着重要作用。
参考文献：Hata R et al.,Scientific Reports(2015) 5 : 9083 | DOI: 10.1038/srep09083 <全文>
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