Western Blot 蛋白质免疫印迹检测
实验原理
先通过电泳使不同蛋白按分子量大小在聚丙烯胺凝胶中依次排列,然后将凝胶中的蛋白质转移至转印膜上,随后用封闭剂覆盖转印膜上未吸附目标蛋白质的区域,最后通过"抗原-抗体"免疫学反应来检测目标蛋白的表达水平。
蛋白质免疫印迹(WB)实验步骤

服务项目 | 服务内容 | 周期 | 常规交付产品 |
Western Blot 检测(整膜) | 1、组织或细胞蛋白提取,蛋白定量,抗体WB 检测(含内参检测); 2、通过预实验优化实验条件,摸索一抗稀释度后进行正式实验。 | 1-2周 | 1、若有剩余样本及抗体全部返还;.曝光结果及实验分析报告. |
1、需要告知样本种属、样本形式、数量、编号、内参、上样顺序、检测指标、整膜等信息,详细填写《雅酶实验代做委托表》(此表请打印后随样品一起寄出);
2、样本∶每孔总的上样量是20微克;组织约黄豆大小,质量至少100-200mg/样,干冰运输;常规细胞量不少于2×106个,若检测指标过多,需要适当增加样本量
3、提供的样品不能石蜡包埋过或泡过多聚甲醛 /TRIZOL;
4、客户可以自行提供目标蛋白和一抗,也可以在本公司订购或由我司代买;10uL/张/指标;抗体尽量原包装不要分装,多余可以返还。
5、需确保提供的实验材料安全无毒、无致病性、无传染性,对人、动植物和环境友好;
6、价格、特殊样本及其他要求需单独咨询。交付周期一般收到样本后2周交付(着急可提前沟通交付时间)
7、WB、ELISA、样本需要干冰运输,特殊染色(冰冻切片需干冰运输)其余常温运输;
| 类别 | 编号 | 服务项目 | 周期 | 规格 | 交付结果 |
| 蛋白检测 | TS1075 | 常规蛋白WB检测 | 视样本数量以及指标数而定 | 张/指标 | 1.化学发光成像图片完整实验报告; 2.灰度值分析结果; 3.实验报告( 细胞、组织未定量提供蛋白定量结果 )。 |
| TS1076 | 其他WB检测相关技术服务 | 咨询 | 张/指标 |
更多技术服务敬请期待哦...
Western-Blot检测细胞中 NF-kB P65,NF-kB pP65(S536),nlrp3的含量
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![]() | NF-kB P65 | |||||
![]() | NF-kB pP65 | |||||
![]() | nlrp3 | |||||
![]() | β-actin | |||||
NF-kB P65灰度值 | 117175 | 353424 | 156758 | 197147 | 384834 | 178123 |
NF-kB pP65 灰度值 | 58905 | 528694 | 118947 | 304528 | 288614 | 169054 |
β-actin 灰度值 | 204863 | 249196 | 228058 | 262360 | 277737 | 273865 |
NF-kB P65/β-actin 灰度值 | 0.571968 | 1.418257 | 0.687360 | 0.751437 | 1.385606 | 0.650404 |
NF-kB pP65/β-actin 灰度值 | 0.287534 | 2.121599 | 0.521565 | 1.160726 | 1.039163 | 0.617290 |
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Anti-Phospho-Histone H2A.X (Ser139) Rabbit mAb [15L14K33]

Western Blot-Anti-Phospho Histone H2A.X(Ser139]Rabbit mAb [15L14K33]
All lanes: R010101 at 1:5,000 dilution
Lane 1: Rat spleen whole tissue lysates
Lane 2: Rat heart whole tissue lysates
Lysates/proteins at 10 ug per lane.
Secondary antibody: Goat Anti-Rabbit lgG(H+L)
HRP Conjugated
(Cat. No. LF102) at 1:5,000 dilution
Predicted band size: 15kDa
Observed band size: 15~17kDa
Developed using the ECL technique (Cat. No. SQ201).

Immunohistochemistry-Anti-Phospho-Histone H2A.X(Ser139) Rabbit mAb [15L14K33]
Sample: Paraformaldehyde-fixed, paraffin embedded human
colorectal carcinoma tissue
Heat mediated antigen retrieval with Tris-EDTA buffer
(pH 9.0) for 30 mins.
Primary antibody: R010101 at 1:200 dilution
Secondary antibody: Goat AntiRabbit lgG (H+L)
HRP conjugated at 1:1,000 dilution
DAB was used as the chromogen.
Counter stained with hematoxylin.
Positive/negative staining were presented.
Only the secondary antibody was used as the negative control.

Immunofluorescence-Anti-Phospho-Histone H2A.X (Ser139)
Rabbit mAb[15L14K33]
Sample: Hela cells
The cells were fixed with 4% paraformaldehyde (10 min)
permeabilized with 0.1%
Triton X-100 for 5 minutes and then blocked with 5% BSA in
0.1% PBS-Tween for 0.5 hours.
Primary antibodies: R010101 at 1:100 dilution and α-tubulin
Mouse MonoclonalAntibody (Cat. No. LF209) at 1:100 dilution
Secondary antibodies: Goat anti-Rabbit (488) at
1:1,000 dilution (shown in green)
and Goat anti-Mouse (555) at 1:1,000 dilution (shown in red)
Nuclei were stained with DAPl (shown in blue)
| 货号 | 名称 | 规格 | 价格 | IF | 专题 |
| WB101 | 一站式高效WB套装 | 套 | 998元 | 69.504 | 解放双手,专注发现!一站式高效WB套装 (WB101) —— 您的WB实验全能伙伴:https://www.ny-bio.com/cn/nd.jsp?id=2115&id=2115 |
| 蛋白提取 | |||||
| PC101-PC103 | RIPA裂解液(强中弱) | 100mL | 168元 | 37.3 | 总蛋白、核蛋白、浆蛋白、膜蛋白、线粒体提取...15种选择让蛋白提取更全面:http://www.ny-bio.com/cn/nd.jsp?id=2015&id=2015 |
| PC201 | 柱式动物组织/细胞总蛋白抽提试剂盒 | 50次 | 498元 | ||
| PC201plus | 柱式动物组织/细胞总蛋白抽提试剂盒(含蛋白酶抑制剂混合液) | 50次 | 658元 | ||
| PC202S | 细胞膜蛋白/浆蛋白提取试剂盒 | 10次 | 398元 | ||
| PC202 | 50次 | 1580元 | |||
| PC203-PC204 | 细胞核蛋白/浆蛋白提取试剂盒(多应用型/WB高效型) | 50次(细胞) | 588元 | ||
| PC205 | 高纯度线粒体及线粒体蛋白提取试剂盒 | 30次 | 498元 | ||
| GRF101 | 蛋白酶抑制剂混合液(不含EDTA)(100×) | 1mL | 298元 | ||
| GRF102 | 磷酸酶抑制剂混合液(100×) | 1mL | 298元 | ||
| GRF103 | 蛋白酶和磷酸酶抑制剂混合液(100×, 不含 EDTA) | 1mL | 398元 | ||
| 蛋白定量 | |||||
| ZJ102 | Omni-Easy™即用型BCA蛋白定量试剂盒 | 500次(微孔) | 298元 | ||
| ZJ102L | 2500次(微孔) | 888元 | |||
| 蛋白电泳 | |||||
| LT101S | Omni-Easy™速溶型蛋白上样缓冲液(变性,还原型,5×) | 1mL×5 | 78元 | 69.504 | WB辅助试剂,4种选择让磷酸化结果更可靠: |
| LT101 | 1mL×15 | 188元 | |||
| LT101L | 1mL×75 | 848元 | |||
| WJ101 | 双色预染蛋白Marker 15kDa~150kDa | 250μL×2 | 398元 | 31.316 | 十种彩虹预染蛋白Marker(含适合近红外荧光成像系统的):http://www.ny-bio.com/cn/nd.jsp?id=757#_np=2_919 |
| WJ101L | 250μL×10 | 1488元 | |||
| WJ102 | 双色预染蛋白Marker 10kDa~250kDa | 250μL×2 | 448元 | ||
| WJ102L | 250μL×10 | 1688元 | |||
| WJ103 | 三色预染蛋白Marker 10kDa~250kDa | 250μL×2 | 448元 | ||
| WJ103L | 250μL×10 | 1688元 | |||
| WJ107 | 三色预染蛋白Marker 10kDa~180kDa | 250μL×2 | 328元 | ||
| WJ107L | 250μL×10 | 1280元 | |||
| WJ402 | 双色预染低分子量蛋白质Marker(1.2~40kDa) | 50μL | 198元 | ||
| WJ402L | 50μL×5 | 798元 | |||
| PS105 | Tris/甘氨酸/SDS电泳缓冲液(10×) | 5L | 558元 | ||
| PS105S | 500mL | 68元 | |||
| TF101 | Tris/甘氨酸/SDS电泳缓冲液速溶颗粒 | 1L×20 | 128元 | ||
| PS111 | 考马斯亮蓝快速染液(免脱色) | 250mL | 168元 | ||
| PS106 | 考马斯亮蓝脱色液 | 5L | 428元 | ||
| PS106S | 500mL | 68元 | |||
| PG610 | 类梯度PAGE胶快速电泳套装 | 125gels(0.75mm胶) | 498元 | 69.504 | 2minPAGE制胶Kit,一步法/两步法/免考染,20种可选:http://www.ny-bio.com/cn/nd.jsp?id=1967&id=1967 |
| PG120-PG124 | 免染PAGE凝胶快速制备试剂盒(6%、7.5%、10%、12.5%、15%) | 125gels(0.75mm胶) | 318元 | ||
| PG220-PG224 | Omni-Easy™一步法免染PAGE凝胶快速制备试剂盒(6%、7.5%、10%、12.5%、15%) | 125gels(0.75mm胶) | 338元 | ||
| PG110-PG114 | PAGE凝胶快速制备试剂盒(6%、7.5%、10%、12.5%、15%) | 125gels(0.75mm胶) | 318元 | ||
| PG210-PG214 | Omni-Easy™一步法PAGE凝胶快速制备试剂盒(6%) | 125gels(0.75mm胶) | 338元 | ||
| PG310 | 一体化低分子量蛋白电泳试剂盒(Tricine-PAGE)(10%) | ≥10次 | 798元 | ||
| PG311 | 一体化低分子量蛋白电泳试剂盒(Tricine-PAGE)(16%) | ≥10次 | 798元 | ||
| LK401-LK410 | Super-PAGE™免染预制胶,Bis-Tris(含MOPS电泳液) | 10片装 | 198元 | ||
| LK201-LK214 | Omni-PAGE™ 预制胶 Hepes | 10片装 | 358元 | ||
| WKM001 | 30%丙烯酰胺/甲叉双丙烯酰胺溶液(Acr-Bis) 29:1 | 500mL | 158元 | ||
| WKM002 | 30%丙烯酰胺/甲叉双丙烯酰胺溶液(Acr-Bis) 37.5:1 | 500mL | 228元 | ||
| 转膜和封闭 | |||||
| OT102 | WB专用转膜海绵垫(免滤纸)Ⅰ型 | 70片 | 178元 | ||
| OT103 | WB专用转膜海绵垫(免滤纸)Ⅱ型 | 70片 | 178元 | ||
| OT101 | 加厚型预裁切滤纸 | 200片 | 228元 | ||
| OT101S | 20片 | 38元 | |||
| WJ001 | PVDF膜(0.22μm) | 340×26.5cm | 1380元 | ||
| WJ001S | 80×60mm×20片 | 328元 | |||
| WJ002 | PVDF膜(0.45μm) | 340×26.5cm | 1380元 | ||
| WJ002S | 80×60mm×20片 | 328元 | |||
| WJ003 | NC膜(0.22μm) | 300×30cm | 1280元 | ||
| WJ003S | 90×70mm×20 | 318元 | |||
| WJ004 | NC膜(0.45μm) | 300×30cm | 1280元 | ||
| WJ004S | 90×70mm×20 | 318元 | |||
| PS112 | 脱脂奶粉 | 100g | 58元 | ||
| PS112L | 500g | 198元 | |||
| PS113 | 封闭用BSA | 10g | 158元 | ||
| PS113L | 100g | 998元 | |||
| PS108 | 无蛋白快速封闭液(5×) | 100mL | 118元 | 41.444 | WB辅助试剂,4种选择让磷酸化结果更可靠:https://www.ny-bio.com/nd.jsp?id=1987#_jcp=1 |
| PS108P | 无蛋白快速封闭液(1×) | 500mL | 128元 | ||
| PS110 | PBS缓冲液(10×)(非灭菌) | 5L | 508元 | ||
| PS110S | 500mL | 68元 | |||
| PS102 | PBS/Tween缓冲液(10×) | 5L | 508元 | ||
| PS102S | 500mL | 68元 | |||
| PS121 | TBS缓冲液(10×) | 5L | 508元 | ||
| PS121S | 500mL | 68元 | |||
| PS103 | TBS/Tween缓冲液(10×) | 5L | 508元 | ||
| PS103S | 500mL | 68元 | |||
| PS118 | 丽春红染液 | 100mL | 98元 | ||
| PS109 | 转膜缓冲液(10×) | 5L | 548元 | ||
| PS109S | 500mL | 68元 | |||
| TF102 | 转膜缓冲液速溶颗粒 | 1L×20 | 128元 | ||
| PS201 | Omni-Flash™免冰浴快速转膜缓冲液(10×) | 5L | 718元 | ||
| PS201S | 500mL | 88元 | |||
| TF105 | 免冰浴快速转膜缓冲液速溶颗粒 | 1L×20 | 258元 | ||
| 抗体孵育 | |||||
| PS114 | WB一抗稀释液 | 100mL | 118元 | ||
| PS115 | WB二抗稀释液 | 100mL | 118元 | ||
| PS119 | 通用型抗体稀释液 | 100mL | 128元 | 8 | WB辅助试剂,4种选择让磷酸化结果更可靠:https://www.ny-bio.com/nd.jsp?id=1987#_jcp=1 |
| PS119L | 500mL | 478元 | |||
| 化学发光 | |||||
| SQ201 | Omni-ECL™超灵敏化学发光检测试剂盒(飞克级) | 100mL | 798元 | 69.5 | ECL发光液低飞克、飞克、皮克灵敏度,持续曝光6h,8种可选:http://www.ny-bio.com/cn/nd.jsp?id=2005&id=2005 |
| SQ201L | 500mL | 3198元 | |||
| SQ203 | Omni-ECL™通用型化学发光检测试剂盒(飞克级) | 100mL | 358元 | ||
| SQ203L | 500mL | 1198元 | |||
| SQ202 | Omni-ECL™基础型化学发光检测试剂盒(皮克级) | 100mL | 258元 | ||
| SQ202L | 500mL | 798元 | |||
| 膜再生 | |||||
| PS107 | WB抗体快速剥离缓冲液(温和通用型) | 500mL | 538元 | 25.269 | WB辅助试剂,4种选择让磷酸化结果更可靠:https://www.ny-bio.com/nd.jsp?id=1987#_jcp=1 |
| PS107S | 100mL | 128元 | |||