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诺扬生物
2025-12-12

Western Blot 蛋白质免疫印迹检测

实验原理

先通过电泳使不同蛋白按分子量大小在聚丙烯胺凝胶中依次排列,然后将凝胶中的蛋白质转移至转印膜上,随后用封闭剂覆盖转印膜上未吸附目标蛋白质的区域,最后通过"抗原-抗体"免疫学反应来检测目标蛋白的表达水平。


蛋白质免疫印迹(WB)实验步骤

图的款式设计 拷贝.png


服务项目

服务内容

周期

常规交付产品

Western Blot 检测(整膜)

1、组织或细胞蛋白提取,蛋白定量,抗体WB 检测(含内参检测);

2、通过预实验优化实验条件,摸索一抗稀释度后进行正式实验。

1-2周

1、若有剩余样本及抗体全部返还;.曝光结果及实验分析报告.


服务说明

1、需要告知样本种属、样本形式、数量、编号、内参、上样顺序、检测指标、整膜等信息,详细填写《雅酶实验代做委托表》(此表请打印后随样品一起寄出);

2、样本∶每孔总的上样量是20微克;组织约黄豆大小,质量至少100-200mg/样,干冰运输;常规细胞量不少于2×106个,若检测指标过多,需要适当增加样本量

3、提供的样品不能石蜡包埋过或泡过多聚甲醛 /TRIZOL;

4、客户可以自行提供目标蛋白和一抗,也可以在本公司订购或由我司代买;10uL/张/指标;抗体尽量原包装不要分装,多余可以返还。

5、需确保提供的实验材料安全无毒、无致病性、无传染性,对人、动植物和环境友好;

6、价格、特殊样本及其他要求需单独咨询。交付周期一般收到样本后2周交付(着急可提前沟通交付时间)

7、WB、ELISA、样本需要干冰运输,特殊染色(冰冻切片需干冰运输)其余常温运输;



类别编号服务项目周期规格交付结果
蛋白检测TS1075常规蛋白WB检测视样本数量以及指标数而定张/指标

1.化学发光成像图片完整实验报告;

2.灰度值分析结果;

3.实验报告( 细胞、组织未定量提供蛋白定量结果 )。

TS1076其他WB检测相关技术服务咨询张/指标


更多技术服务敬请期待哦...


实验结果案例分享



Western-Blot检测细胞中 NF-kB P65,NF-kB pP65(S536),nlrp3的含量

1

2

3

4

5

6
 NF-kB P65
 NF-kB pP65
 nlrp3
 β-actin


NF-kB P65灰度值

117175

353424

156758

197147

384834

178123

NF-kB pP65 灰度值

58905

528694

118947

304528

288614

169054

β-actin 灰度值

204863

249196

228058

262360

277737

273865

NF-kB P65/β-actin 灰度值

0.571968

1.418257

0.687360

0.751437

1.385606

0.650404

NF-kB pP65/β-actin 灰度值

0.287534

2.121599

0.521565

1.160726

1.039163

0.617290


雅酶精品抗体

精品重组抗体,实事求是做好每一次验证实验!14000+抗体,20µL/50µL/100µL可选,可指导实验,可寄样优化条件,认真对待您的每一次体验!


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雅酶精品抗体结果展示


Anti-Phospho-Histone H2A.X (Ser139) Rabbit mAb [15L14K33]

   

Western Blot-Anti-Phospho Histone H2A.X(Ser139]Rabbit mAb [15L14K33]

All lanes: R010101 at 1:5,000 dilution

Lane 1: Rat spleen whole tissue lysates

Lane 2: Rat heart whole tissue lysates

Lysates/proteins at 10 ug per lane.

Secondary antibody: Goat Anti-Rabbit lgG(H+L)

HRP Conjugated

(Cat. No. LF102) at 1:5,000 dilution

Predicted band size: 15kDa

Observed band size: 15~17kDa

Developed using the ECL technique (Cat. No. SQ201).



Immunohistochemistry-Anti-Phospho-Histone H2A.X(Ser139) Rabbit mAb [15L14K33]

Sample: Paraformaldehyde-fixed, paraffin embedded human

colorectal carcinoma tissue

Heat mediated antigen retrieval with Tris-EDTA buffer

(pH 9.0) for 30 mins.

Primary antibody: R010101 at 1:200 dilution

Secondary antibody: Goat AntiRabbit lgG (H+L)

HRP conjugated at 1:1,000 dilution

DAB was used as the chromogen.

Counter stained with hematoxylin.

Positive/negative staining were presented.

Only the secondary antibody was used as the negative control.


Immunofluorescence-Anti-Phospho-Histone H2A.X (Ser139)

Rabbit mAb[15L14K33]

Sample: Hela cells

The cells were fixed with 4% paraformaldehyde (10 min)

permeabilized with 0.1%

Triton X-100 for 5 minutes and then blocked with 5% BSA in

0.1% PBS-Tween for 0.5 hours.

Primary antibodies: R010101 at 1:100 dilution and α-tubulin

Mouse MonoclonalAntibody (Cat. No. LF209) at 1:100 dilution

Secondary antibodies: Goat anti-Rabbit (488) at

1:1,000 dilution (shown in green)

and Goat anti-Mouse (555) at 1:1,000 dilution (shown in red)

Nuclei were stained with DAPl (shown in blue)







雅酶WB配套产品


货号名称规格价格IF专题
WB101一站式高效WB套装998元
69.504解放双手,专注发现!一站式高效WB套装 (WB101) —— 您的WB实验全能伙伴:https://www.ny-bio.com/cn/nd.jsp?id=2115&id=2115
蛋白提取
PC101-PC103RIPA裂解液(强中弱)100mL168元37.3总蛋白、核蛋白、浆蛋白、膜蛋白、线粒体提取...15种选择让蛋白提取更全面:http://www.ny-bio.com/cn/nd.jsp?id=2015&id=2015
PC201柱式动物组织/细胞总蛋白抽提试剂盒50次498元
PC201plus柱式动物组织/细胞总蛋白抽提试剂盒(含蛋白酶抑制剂混合液)50次658元
PC202S细胞膜蛋白/浆蛋白提取试剂盒10次398元
PC20250次1580元
PC203-PC204细胞核蛋白/浆蛋白提取试剂盒(多应用型/WB高效型)50次(细胞)588元
PC205高纯度线粒体及线粒体蛋白提取试剂盒30次498元
GRF101蛋白酶抑制剂混合液(不含EDTA)(100×)1mL298元
GRF102磷酸酶抑制剂混合液(100×)1mL298元
GRF103蛋白酶和磷酸酶抑制剂混合液(100×, 不含 EDTA)1mL398元
蛋白定量
ZJ102Omni-Easy™即用型BCA蛋白定量试剂盒500次(微孔)298元

ZJ102L2500次(微孔)888元

蛋白电泳
LT101SOmni-Easy™速溶型蛋白上样缓冲液(变性,还原型,5×)1mL×578元69.504

WB辅助试剂,4种选择让磷酸化结果更可靠:

https://www.ny-bio.com/nd.jsp?id=1987#_jcp=1

LT1011mL×15188元
LT101L1mL×75848元
WJ101双色预染蛋白Marker 15kDa~150kDa250μL×2398元31.316十种彩虹预染蛋白Marker(含适合近红外荧光成像系统的)http://www.ny-bio.com/cn/nd.jsp?id=757#_np=2_919
WJ101L250μL×101488元
WJ102双色预染蛋白Marker 10kDa~250kDa250μL×2448元
WJ102L250μL×101688元
WJ103三色预染蛋白Marker 10kDa~250kDa250μL×2448元
WJ103L250μL×101688元
WJ107三色预染蛋白Marker 10kDa~180kDa250μL×2328元
WJ107L250μL×101280元
WJ402双色预染低分子量蛋白质Marker(1.2~40kDa)50μL198元
WJ402L50μL×5798元
PS105Tris/甘氨酸/SDS电泳缓冲液(10×)5L558元

PS105S500mL68元

TF101Tris/甘氨酸/SDS电泳缓冲液速溶颗粒1L×20128元

PS111考马斯亮蓝快速染液(免脱色)250mL168元

PS106考马斯亮蓝脱色液5L428元

PS106S500mL68元

PG610类梯度PAGE胶快速电泳套装125gels(0.75mm胶)498元69.5042minPAGE制胶Kit,一步法/两步法/免考染,20种可选:http://www.ny-bio.com/cn/nd.jsp?id=1967&id=1967
PG120-PG124免染PAGE凝胶快速制备试剂盒(6%、7.5%、10%、12.5%、15%)125gels(0.75mm胶)318元
PG220-PG224Omni-Easy™一步法免染PAGE凝胶快速制备试剂盒(6%、7.5%、10%、12.5%、15%)125gels(0.75mm胶)338元
PG110-PG114PAGE凝胶快速制备试剂盒(6%、7.5%、10%、12.5%、15%)125gels(0.75mm胶)318元
PG210-PG214Omni-Easy™一步法PAGE凝胶快速制备试剂盒(6%)125gels(0.75mm胶)338元
PG310一体化低分子量蛋白电泳试剂盒(Tricine-PAGE)(10%)≥10次798元

PG311一体化低分子量蛋白电泳试剂盒(Tricine-PAGE)(16%)≥10次798元

LK401-LK410Super-PAGE™免染预制胶,Bis-Tris(含MOPS电泳液)10片装198元

LK201-LK214Omni-PAGE™ 预制胶 Hepes10片装358元

WKM00130%丙烯酰胺/甲叉双丙烯酰胺溶液(Acr-Bis) 29:1500mL158元

WKM00230%丙烯酰胺/甲叉双丙烯酰胺溶液(Acr-Bis) 37.5:1500mL228元

转膜和封闭
OT102WB专用转膜海绵垫(免滤纸)Ⅰ型70178元

OT103WB专用转膜海绵垫(免滤纸)Ⅱ型70片178元

OT101加厚型预裁切滤纸200片228元

OT101S2038元

WJ001PVDF膜(0.22μm)340×26.5cm1380元

WJ001S80×60mm×20片328元

WJ002PVDF膜(0.45μm)340×26.5cm1380元

WJ002S80×60mm×20片328元

WJ003NC膜(0.22μm)300×30cm1280元

WJ003S90×70mm×20318元

WJ004NC膜(0.45μm)300×30cm1280元

WJ004S90×70mm×20318元

PS112脱脂奶粉100g58元

PS112L500g198元

PS113封闭用BSA10g158元

PS113L100g998元

PS108蛋白快速封闭液(5×)100mL118元41.444WB辅助试剂,4种选择让磷酸化结果更可靠:https://www.ny-bio.com/nd.jsp?id=1987#_jcp=1
PS108P无蛋白快速封闭液(1×)500mL128元
PS110PBS缓冲液(10×)(非灭菌)5L508元

PS110S500mL68元

PS102PBS/Tween缓冲液(10×)5L508元

PS102S500mL68元

PS121TBS缓冲液(10×)5L508元

PS121S500mL68元

PS103TBS/Tween缓冲液(10×)5L508元

PS103S500mL68元

PS118丽春红染液100mL98元

PS109转膜缓冲液(10×)5L548元

PS109S500mL68元

TF102转膜缓冲液速溶颗粒1L×20128元

PS201Omni-Flash™免冰浴快速转膜缓冲液(10×)5L718元

PS201S500mL88元

TF105免冰浴快速转膜缓冲液速溶颗粒1L×20258元

抗体孵育
PS114WB一抗稀释液100mL118元

PS115WB二抗稀释液100mL118元

PS119通用型抗体稀释液100mL128元8WB辅助试剂,4种选择让磷酸化结果更可靠:https://www.ny-bio.com/nd.jsp?id=1987#_jcp=1
PS119L500mL478元
化学发光
SQ201Omni-ECL™超灵敏化学发光检测试剂盒(飞克级)100mL798元69.5ECL发光液低飞克、飞克、皮克灵敏度,持续曝光6h,8种可选:http://www.ny-bio.com/cn/nd.jsp?id=2005&id=2005
SQ201L500mL3198元
SQ203Omni-ECL™通用型化学发光检测试剂盒(飞克级)100mL358元
SQ203L500mL1198元
SQ202Omni-ECL™基础型化学发光检测试剂盒(皮克级)100mL258元
SQ202L500mL798元
膜再生
PS107WB抗体快速剥离缓冲液(温和通用型)500mL538元25.269WB辅助试剂,4种选择让磷酸化结果更可靠:https://www.ny-bio.com/nd.jsp?id=1987#_jcp=1
PS107S100mL128元






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