谁没被组蛋白提取狠狠折磨过!

核内组蛋白和DNA结合极其紧密
实验稍不留神就踩坑:
裂解不充分产量低~
杂蛋白去不掉~
电泳条带杂乱、拖尾~
提取条件一旦控制不好,
目标修饰还可能受到影响~

市面上的试剂盒
往往只能搞定其中一两个痛点
但想要裂解充分、纯度佳、
表观修饰完整保留同时实现
实在太难了!


纯度佳
高效富集细胞与组织样本中的组蛋白,产物纯度可达90%以上

修饰全
提取条件温和可控,最大程度保留组蛋白甲基化、乙酰化、磷酸化、泛素化及SUMO化等各类翻译后修饰

得率高
所得组蛋白无需浓缩,可直接上样开展SDS-PAGE检测

易操作
采用纯试剂法破碎细胞,操作简便,无需复杂设备

应用广
提取的组蛋白适用于SDS-PAGE、Western Blot、ELISA及质谱分析等实验

说得再好,也得过实验这一关
PC206表现如何?
纯 度 佳
市售部分组蛋白提取试剂盒的提取产物纯度参差,杂蛋白残留较多。雅酶PC206采用优化后的经典酸提取法,可获得纯度更高、杂蛋白更少的组蛋白。
实际提取效果如何?咱们一起看看PC206的表现。

图1 1×107个CHO-S细胞中提取的组蛋白
SDS-PAGE结果
结 论
全细胞裂解液组分复杂、蛋白条带杂乱;而使用PC206获得的组蛋白提取液,H1、H3/H2B、H2A、H4条带清晰锐利、背景干净。
通 用 性 强


图2 不同细胞系与小鼠组织中提取的
组蛋白SDS-PAGE结果
结 论
使用雅酶PC206分别从CHO-S、HeLa、HEK293F三种细胞系及小鼠肝、脾、肾三种组织中提取组蛋白。
上述样本中的H1、H3/H2B、H2A和H4组蛋白均能被稳定、完整地提取,提取产物纯度高。结果表明,PC206适用于上述悬浮细胞、贴壁细胞及组织样本。
修 饰 全

图3 组蛋白修饰WB检测结果

抗 体
Anti-TriMethyl-Histone H3 (Lys4) Rabbit pAb(H3K4me3,货号:P104789)
Anti-DiMethyl-Histone H3 (Lys4) Rabbit mAb [56R21G49](H3K4me2,货号:R015381)
Anti-DiMethyl-Histone H3 (Lys9) Rabbit mAb [18I76I42](H3K9me2,货号:R015382)
Anti-TriMethyl-Histone H3 (Lys27) Rabbit mAb [92S05C12](H3K27me3,货号:R015388)
Anti-Acetyl-Histone H3 (Lys27) Rabbit mAb [67L91M72](H3K27ac,货号:R012098)

显 影
Omni-ECL™单组分超灵敏化学发光底物(低飞克级)

结 论
五种修饰对应的条带均清晰可辨,表明PC206提取的组蛋白可用于上述修饰的WB检测。
雅酶PC206提取的组蛋白可用于组蛋白修饰WB分析、质谱鉴定及修饰位点检测等下游实验,为表观遗传研究提供支持。
产品信息
货号 | 名称 | 规格 | 价格 |
PC206 | 组蛋白提取试剂盒 | 50次 | 558元 |
一点经验
⑴组蛋白修饰的WB检测结果受抗体特异性、上样量及曝光条件等因素影响,首次使用时建议通过梯度实验优化检测条件;
⑵起始细胞量或组织类型不同时,可参照说明书适当调整裂解液与提取液的用量;
⑶本试剂盒的提取条件可能导致组氨酸磷酸化修饰丢失,研究组氨酸磷酸化相关课题的研究者请慎用本试剂盒;
⑷本文验证样本包括CHO-S、HeLa、HEK293F细胞及小鼠肝、脾、肾组织;其它物种或样本类型的提取效果,需结合实际样本进一步验证。
组蛋白提取,看似只是实验的第一步
却决定了后面每一步的成色
提得纯、提得稳
让目标修饰得到有效保留
全都必不可少

一款合适的试剂盒
省的是操作,稳的是质量
让表观遗传研究
从第一管样本开始,就毫不含糊!