雅酶：膨胀显微成像全攻略，倒置荧光显微镜秒变超分辨神器！
做免疫荧光的科研人谁没崩溃过？
普通宽场镜拍出来的细胞器糊成一团，
蛋白共定位真假难辨
想升级又贵又高级的共聚焦，但......
别慌！
雅酶基于膨胀显微成像技术打造的细胞膨胀胶
不用添置昂贵设备，仅靠样本物理放大
就能让普通倒置荧光显微镜拍出
媲美共聚焦的高清亚细胞图像
点击放大查看
先划重点！
膨胀胶使用红线
01
显微镜性能要“过硬”
首先，您要拥有一台性能优良的倒置荧光显微镜。
那如何判断显微镜性能行不行呢？
最简单的，常用的DAPI染色的样本开满荧光，目镜观测刺眼，就符合要求。
02
细胞膨胀显微试剂盒仅适配固定细胞，不可用于活细胞、组织。
PS：组织样本有专门的膨胀显微试剂盒呦！雅酶：用了雅酶组织膨胀胶，人手一台共聚焦。
03
带细胞壁的细胞需先去壁制备原生质体，才能进行膨胀处理。
04
制胶模具清洗后可反复使用。
05
成像时需根据物镜镜头使用相匹配的耗材，比如在油镜下观察或拍照需使用玻底皿，空气镜需使用载玻片。.
膨胀胶实操要点
悬浮细胞的膨胀
悬浮细胞需先固定于细胞爬片/中低吸附载玻片：
（1）
细胞量满足免疫荧光标准；
（2）
取10μL细胞悬液加等量10μL固定液混匀滴于爬片；
（3）
室温或 37℃ 烘箱烘干；
（4）
PBS 漂洗，完成细胞固定。
PS：烘干后的样本不可湿态存放，极易发生细胞脱落。后续可按免疫荧光步骤操作，再进行显微膨胀。
提高荧光二抗或一抗使用浓度
染色的荧光强度与空间大小成反比，样本膨胀后体积变大，荧光信号会减弱，需增强染色亮度。
最简单的方法是提高荧光二抗的使用浓度。例如，原本1:1,000使用荧光⼆抗，此时可以提高至1:100~1:200。如果提高荧光二抗浓度后结果仍不理想，也可以适当提高一抗浓度。
膨胀前需镜检确认荧光强度达标，再继续实验。
DAPI复染
DAPI等小分子染料不能与生物大分子形成共价键，在膨胀的过程中可能会慢慢丢失，导致信号降低。
此时，使用双蒸水配置的DAPI染液复染5min即可。禁用含盐液体，防止凝胶收缩。
膨胀胶拍照常见问题预警
局部图像模糊属正常现象，无需焦虑
凝胶三维均匀拉伸后样本厚度显著增加，宽场荧光显微镜缺乏对样本不同高度光衍射的屏蔽，高倍镜拍摄易出现局部模糊，该情况不会干扰目标观测区域的分辨效果。
40倍物镜全景拍摄操作技巧
若需用 40 倍物镜拍摄完整细胞，可以切换多个焦平面分次拍摄多张图像，再对这些照片进行Projection处理。
神器登场！
雅酶ZX102膨胀胶产品全解析
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利用膨胀显微技术，轻松获得超高分辨图像
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3D均匀膨胀，不改变生物分子的空间分布
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用普通试剂的成本获得超高分辨的图像
货号 | 产品名称 | 规格 | 价格 |
ZX102 | 细胞膨胀显微试剂盒(4.5倍) | 25次 | 338元 |
ZX102L | 25次×5 | 1380元 |
接下来咱们看看
这款产品的具体应用
虽说ZX102可实现样本4.5倍标准膨胀
但不少小伙伴实操时还有其他的需求：
希望灵活自定义样本放大倍率
或者想要更大膨胀倍数，
把堆叠拥挤的荧光信号充分拉开
这类需求可以实现吗？
那当然啦！
神器Pro登场！
雅酶ZX103细胞膨胀显微
试剂盒(≥8倍)
货号 | 产品名称 | 规格 | 价格 |
ZX103 | 细胞膨胀显微试剂盒(≥8倍) | 25次 | 428元 |
ZX103L | 25次×5 | 1680元 |
小伙伴们如果需要凝胶线性膨胀倍数在3.5~5.5倍之间，可以通过用纯净水稀释的不同倍数的PBS进行膨胀：
膨胀用液 | 稀释倍数 |
0.5×PBS | 3.5倍 |
0.3×PBS | 4.5倍 |
0.1×PBS | 5.5倍 |
纯净水 | 8-10倍 |
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