诺扬生物

Human Angiopoietin-like 4 (血管生成素类似物4) ELISA kit，货号：CHE0154

简介

血管生成素样蛋白4（angiopoietin-like protein 4，ANGPTL4）是近年来发现的一种新的分泌型糖蛋白， 它与脂代谢、血管生成、肿瘤以及其他代谢性疾病等密切相关。 ANGPTLs是一个与血管生成素结构类似的蛋白质家族。至今共发现有 8 种家族成员并分别命名为 ANGPTL1-8。所有的ANGPTLs都包含有一个N末端信号序列、一个单一的可变长度、一个卷曲螺旋结构和一 个巨大的类血管生成素结构域。与经典的血管生成素与其受体 Tie1 或 Tie2 结合不同的是，ANGPTLs 并不与此 受体结合而是孤儿配体。然而，大量的研究显示 ANGPTLs与血管生成素作用相似，参与了血管生成的主要调节 过程。

2000年KIM 等在人类及小鼠组织内发现 ANGPTL 基因与蛋白，其中ANGPTL4 基因在肝细胞中表达，其蛋 白主要存在于血液循环系统和肝细胞内，被命名为肝脏纤维蛋白原/血管生成素相关蛋白（HEARP）。 2002年人类基因组织根据该基因和蛋白的结构和功能将其命名为 ANGPTL4。

人类ANGPTL4 基因定位于 19p13.3，有7 个外显子和 6 个内含子，基因cDNA 全长为1943bp，开放阅读 框1218bp，编码406个氨基酸，相对分子质量为 45200。尽管ANGPTL4 的专一受体尚未发现，但是其连接的 整合蛋白和其他的相关细胞外基质蛋白在几种细胞类型中已有报道。GOH等研究显示 ANGPTL4 与整合蛋白 5 和整合蛋白 1 连接调节角化细胞的迁移。HUANG等研究发现 AN-GPTL4 结合并激活整合素α5β1 介导的 Rac1/PAK 信号通路减弱细胞与细胞间的联系，随后 ANGPTL4 与内皮细胞钙黏蛋白和 claudin-5 结合并作用于 血管内皮细胞连接处，破坏血管内皮细胞屏障功能。

ANGPTL4 基因表达的蛋白主要表达于胚胎组织和脂肪组织中，但在肺、肾、血浆、垂体、骨骼肌、肝脏和 心脏中也有表达。ANGPTL4 具有调节脂蛋白代谢和血管生成等功能。ANGPTL4 与小鼠模型中新生血管性相关 疾病、肿瘤的生长转移、细胞凋亡和缺氧诱导视网膜病变都密切相关。

检测原理

本实验采用双抗体夹心 ELISA。用抗人Angiopoietin-like 4 单克隆抗体预包被酶标板，加入适度稀释的样本和标 准品，其中的 Angiopoietin-like 4 会与其单抗结合，洗去游离成分；加入生物素化的抗人 Angiopoietin-like 4 抗 体，抗人Angiopoietin-like 4 抗体与结合在单抗上的人 Angiopoietin-like 4 结合而形成免疫复合物，洗去游离的 成分；加入辣根过氧化物酶标记的亲合素，生物素与亲合素特异性结合，洗去未结合的酶结合物；加入显色剂， 若反应孔中有 Angiopoietin-like 4，辣根过氧化物酶会使无色的显色剂现蓝色；加终止液变黄。在 450nm 下测 OD值，Angiopoietin-like 4 浓度与OD450 值之间呈正比，可通过绘制标准曲线计算出标本中 Angiopoietin-like 4 浓度。

Representative standard curve for Angiopoietin-like 4 ELISA. Angiopoietin-like 4 was diluted in serial two-fold steps in Sample Diluent.