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Ethachinmate 乙醇沉淀核酸载体，货号-规格：312-01791-0.2 ml
Ethachinmate共沉淀剂
Ethachinmate
◆原理
共沉淀剂Ethachinmate是基因工程学的标准时机。作为畅销产品，效果显著。
Ethachinmate适用于核酸（DNA与RNA）乙醇或isopropanol沉淀时的丙烯酰胺系高分子载体溶液，在盐类存在的情况下（例如 ＞0.1 mol/L Sodium Acetate）加上Ethachinmate进行酒精沉淀，能得到如下优点。
◆优点・特色
● 可回收微量核酸
可定量性回收20 ng/mL以上的DNA（＞100个碱基对）及（＞120个碱基）。
● 乙醇沉淀迅速
无需-20℃或-80℃孵化，添加乙醇后可直接离心。
● 酶反应无障碍
回收的核酸，在水及缓冲液中容易溶解。混在一起的Ethachinmate完全不阻碍酶反应。
● 沉淀可观察到
由于Ethachinmate本身会通过酒精沉淀形成沉淀，因此，即使是在只有微量核酸的情况下，也无需担心重要的样本被冲洗掉。
无DNase，RNase活性测试剂
用一下DNase及RNase free方法可确认是否含有Ethachinmate
DNase实验：向1 μgλ/Hin d III 中加入3 μL Ethachinmate，在37℃的恒温箱中放置16小时候，进行琼脂糖凝胶电泳，图像确认无变化。
RNase实验：向2 μg 16S及23S的rRNA中加入3 μL Ethachinmate，在37℃的恒温箱中放置16小时后，进行琼脂糖凝胶电泳，图像确认无变化。
◆使用方法
DNA或者RNA溶液（100 μL）
↓ ←3 mol/L Sodium Acetate（添加），3，3 μL *1）
↓ ←Ethachinmate 1 μL *2）
↓ ←涡流
↓ ←2~2.5倍量的乙醇
↓ 涡流 *3）
↓ 10 kg x g室温下反应5分钟 *4）
沉淀 *5）
*1）（氯）盐的最终浓度必须在0.1 mol/L以上
*2）每100μL DNA或RNA溶液中加入1 μL Ethachinmate。但溶液量为300 μL以上时，加入3 μL可达到饱和。
*2）而且再次进行上述操作时，无需添加Ethachinamte。（若反复添加Ethachinmate会导致DNA溶液变得
*2）黏稠，影响到后面的操作。）
*3）进行充分混匀，可实现微量DNA的定量回收。
*4）不必进行冷却
*5）沉淀可目测。溶解于其他缓冲液等中，可直接作为各种酶底物使用。而且，必须用70%的乙醇进行洗涤。
Q： 有没有DNase，Rnase杂质？
A： 没有。Ethachinmate用以下的方法可以确认无DNae、RNase活性。
Dnase 实验：向1 μg的/Hin d III中加入3 μL Ethachinmate，在37℃的恒温箱中放置16小时候，进行琼脂
糖凝胶电泳，图像确认无变化。
RNase实验：向2 μg 16S及23S的rRNA中加入3μL Ethachinmate，在37℃的恒温箱中放置16小时后，进
行琼脂糖凝胶电泳，图像确认无变化。
Q： 可以使用RNA回收吗？
A： 没有问题。
Q： 高效回收的核酸浓度和核酸链长度是多少？
A： 可回收几乎所有的20 ng/mL以上的DNA（100 bp以上）及RNA（120 base以上）。
Q： 260 nm的吸光度会影响定量吗？
A： 无影响。
Q： 100 μL DNA溶液对应加入1 μL Ethachinmate。若DNA溶液少于100 μL，应该怎样做才好？
A： 请加入1 μL Ethachinmate。为了DNA沉淀可目测，需要1 μL以上的Ethachinmate。另外，3M Sodium
Acetate及1 μL的Ethachinmate。
Q： 300 μL以上的DNA溶液，Ethachinmate的添加量是多少？
A： DNA溶液为300 μL以上，无论DNA溶液的量是多少，都请加入3 μL Ethachinmate。无需加入过量的Eth-
achinmate。另外，3M Sodium Acetate请按此比例换算适量添加。
例：DNA溶液为600 μL，则加入19.8 μL的3M Sodium Acetate及3 μL的Ethachinmate
Q： DNA溶液进行2次以上乙醇沉淀时，最好第二次以后也每次加上Ethachinmate吗？
A： Ethachinmate添加一次无需再添加，如果重复添加Ethachinmate，DNA溶液会变得黏稠，将阻碍以后的
操作。
Q： 冷冻时，会不会影响Ethachinmate的效果？
A： 不会
Q： 高压处理会不会影响Ethachinmate的效果？
A： 不会
Q： 如果用苯酚/氯仿处理含Ethachinmate的DNA溶液，会不会影响Ethachinmate的效果？
A： 不会
Q： 对电泳模型有没有影响？
A： 没有，但根据电泳条件的不同，数十kbp以上的DNA会产生宽频带条。
Q： 对限制性内切酶反应有没有影响？
A： 没有。
Q： 对T4 DNA Ligase反应有没有影响？
A： 没有。
Q： 对AMV Reverse Transcroptase的cDNA合成反应有没有影响？
A： 没有。
Q： 对使用Taq DNA Polymerase的PCR反应有没有影响？
A： 没有。
Q： 对Klenow Flagment反应有没有影响？
A： 没有。
Q： 对大肠杆菌的转化有没有影响？
A： 没有。
Q： 对in vitro组装有没有影响？
A： λ 噬菌体的in vitro组装效率稍微下降。
Q： 加入Ethachinmate，乙醇沉淀会形成核苷酸沉淀吗？
A： 使用8mer及17mer的的低聚核苷酸进行实验，与是否添加Ethachinmate无关，回收率没有变化。
Q： 在含有甲酰胺的杂交溶液中有无变性吗？
A： 无变性。
Q： 对blotting有没有影响？
A： 没有。
Q： 对序列反应有没有影响？
A： 不影响使用ABI Prism 377的周序列反应。对脱氧发的序列反应也没有影响。
Q： 添加Ethachinmate是否有助于从管中脱落沉淀？
A： 要看管的材质。比如Eppendorf公司制的Safe-Lock管有容易脱落的倾向。