CloneJET PCR 克隆试剂盒,货号-规格:K1231-20 rxns
规格
| Bacterial or Yeast Strain: | 不包括在内 |
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| 适用于(应用): | PCR Cloning |
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| Vector: | pJET1.2/blunt |
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| 产品规格: | Kit |
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| 产品类型: | PCR Cloning Kit |
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| 数量: | 20次反应 |
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| 耐抗生素细菌: | 氨苄青霉素 (AmpR) |
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| 克隆方法: | 限制性内切酶 ⁄ MCS,平末端 PCR |
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| 产品线: | CloneJET |
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描述
Thermo Scientific CloneJET PCR 克隆试剂盒也可用于 DH10B 细胞 (K123120),是一款先进的阳性选择系统,可高效克隆由任何热稳定 DNA 聚合酶生成的 PCR 产物。也可以克隆任何其他的钝性或黏性末端DNA片段。其非常适用于磷酸化或非磷酸化DNA片段。只需 5 分钟即可连接至所包含的阳性分选载体,并产生超过 99% 的重组克隆。将由校正酶生成的平末端 PCR 产物直接接入克隆载体。在连接前 5 分钟内使用试剂盒提供的热稳定 DNA 平末端化酶将由非校正 DNA 聚合酶或 DNA 聚合酶混合物生成的 PCR 产物处理成平末端。所有常见的实验室大肠杆菌菌株都可以使用连接产物直接进行转化。特点CloneJET PCR 克隆试剂盒中包含一种新的即用型阳性选择克隆载体 pJET1.2/blunt。该载体中有一个致命型限制性酶基因,此基因在 DNA 插入片段接入克隆位点后即被破坏。因此,只有含重组质粒的细菌细胞才能形成菌落。不含插入片段的再循环 pJET1.2/blunt 载体分子会表达致死性限制性内切酶,继而在转化后杀死宿主大肠杆菌细胞。此阳性选择大大加快了菌落筛选的进程,节省了蓝白斑筛选所需的额外成本。为了便于对插入片段进行映射和处理,pJET1.2/blunt 克隆载体的多克隆位点包含两个 BglII 识别序列,位于插入位点两侧。此外,载体含有用于体外和体内转录以及插入片段测序的 T7 启动子。产品优势•快速—在仅 5 分钟内完成 PCR 克隆•较高效率–>99% 阳性克隆•无克隆背景—阳性选择载体•多用途—是平末端或黏性末端克隆的理想选择•经济—无需进行昂贵的蓝白斑筛选应用•克隆高达 10 kb 的平末端或 '3-dA 尾 PCR 产物•克隆限制性内切酶生成的 DNA 片段•克隆 DNA 测序•从 T7 启动子体外和体内转录克隆插入片段包括•pJET1.2/blunt 克隆载体• T4 DNA 连接酶• 2X 反应缓冲液• DNA 平末端化酶• pJET1.2 正向测序引物 (5'-CGACTCACTATAGGGAGAGCGGC-3'
)• pJET1.2 反向测序引物 (5'-AAGAACATCGATTTTCCATGGCAG-3'
)• 对照 PCR 产物• 无核酸酶水•详细方案电穿孔前,始终使用 GeneJET PCR 纯化试剂盒 #K0701 对连接混合物进行柱纯化或使用氯仿进行提取。混合物中存在蛋白质和盐分会抑制电穿孔。相关产品CloneJET PCR 克隆试剂盒快速 DNA 末端修复试剂盒