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ATCC转化株（上皮HPV-16 E6 / E7转化），货号：TCH-C377
HBE135-E6E7细胞系衍生自正常肺支气管上皮，该正常支气管上皮取自一名接受肺叶切除术的鳞状细胞癌患者。来自第一代外植体的细胞在其第一代中被含有人乳头瘤病毒（HPV）E6E7基因的重组逆转录病毒LXSN16E6E7感染。在0.4 mg / mL G418的存在下选择细胞。
细胞名称：ATCC转化株（上皮HPV-16 E6 / E7转化）
细胞简称：HBE-E6E7
产品货号：TCH-C377
种属来源：人
组织来源：肺/支气管
疾病特征：/
细胞形态：上皮细胞样
生长特性：贴壁生长
培养体系：KM+5ng/mL人重组EGF（不过滤）+0.05mg/mL牛垂体提取物+500ng /mL氢化可的松+0.005mg/mL胰岛素+1%P/S
配套培养基货号：TCH-G377
传代比例：1:2-1:3，每2-3天换液一次
传代周期：72-96 h
培养条件：气相：95%空气+5%CO2，温度：37℃
冻存条件：60%基础培养基+30%FBS+10%DMSO，液氮储存
质量检测：细菌、真菌、支原体检测均为阴性
参考文献：
Tsao MS, et al. Autocrine growth loop of the epidermal growth factor receptor in normal and immortalized human bronchial epithelial cells. Exp. Cell Res. 223: 268-273, 1996. PubMed: 8601403
The cell line was established from normal bronchus tissue taken at lobectomy for squamous cell carcinoma. The tissue used was at least 3 cm from the edge of the tumor.
Wigle DA, et al. Molecular profiling of non-small cell lung cancer and correlation with disease-free survival. Cancer Res. 62: 3005-3008, 2002. PubMed: 12036904
| 细胞接收后处理方法
1.运输方式：冻存管（默认发送方式）
① 请在收到细胞后，先检查包装是否完整，干冰是否充足，冻存管有无破损等情况，并核对细胞管上的标签信息，细胞管数是否与发货清单一致。如有异常情况，请及时与我们联系。
② 收到细胞后如不立即进行实验，则请将细胞放至-80℃或液氮中保存。
③ 实验前开启水浴锅并预热培养基，并备好15mL离心管加入5mL预热后的培养基。
④ 将冻存管置于37℃水浴锅内，快速摇动解冻直到内容物融化，同时需注意避免水面没过管口。
⑤ 将冻存管外壁进行常规消毒后，在超净台内小心开盖，尽量避免气泡溢出，轻柔吹打数次，转移至15mL离心管内。使用1 mL培养基清洗冻存管内壁，一并收集至15mL离心管内。
⑥ 250g离心5min，收集细胞沉淀，弃掉上清并加入2mL完全培养基重悬。
⑦ 取20μL细胞悬液至EP管，台盼蓝染色并计数，记录细胞数量和存活率。如有异常请及时与我们联系，如无台盼蓝，可略过该步骤。
⑧ 将重悬后的细胞接种至合适大小的培养器皿中，放置于培养箱内进行培养。
⑨ 24h后镜下拍照并反馈我们，换液后继续培养。
2.运输方式：培养瓶（贴壁细胞）
① 请在收到细胞后，先检查包装是否完整，有无破损漏液的情况，并核对细胞瓶上的标签信息，细胞瓶数是否与发货清单一致。如有异常情况，请及时与我们联系。
② 观察瓶内的培养基是否澄清，镜下观察细胞是否状态良好，并将细胞容器外壁进行常规消毒后，置于培养箱内放置2-3h，让脱壁的细胞可以重新贴附。
③ 小心开盖移去瓶内的培养基，更换为细胞专用的完全培养基，按照培养器皿决定用量。若细胞脱壁过多，可将原培养基离心获得细胞沉淀，再接种回原瓶内。
④ 镜下拍照并反馈我们，如细胞汇合度较低，则放置于培养箱内进行培养。如细胞汇合度达到80%以上，则可按照常规方法进行消化传代。
3.运输方式：培养瓶（悬浮细胞）
① 请在收到细胞后，先检查包装是否完整，有无破损漏液的情况，并核对细胞瓶上的标签信息，细胞瓶数是否与发货清单一致。如有异常情况，请及时与我们联系。
② 观察瓶内的培养基是否澄清，镜下观察细胞是否状态良好，拍照并反馈我们。
③ 将细胞容器外壁进行常规消毒后，置于超净工作台内小心开盖。将瓶内的培养基全部转移至若干50 mL离心管内，并清洗培养瓶内壁一并收集。
④ 250g离心5min收集细胞沉淀，弃掉上清，使用新鲜的完全培养基重悬至合适密度。接种至合适的培养器皿中，置于培养箱内培养。
⑤ 培养24h后观察细胞状态和密度，按照常规方法进行传代。
4.运输方式：血清管
① 请在收到细胞后，先检查包装是否完整，有无破损漏液的情况，并核对细胞管上的标签信息，细胞管数是否与发货清单一致。如有异常情况，请及时与我们联系。
② 收到细胞后请尽快进行实验，如不能及时处理，请将细胞放至常温环境，通常15-25℃为佳，并尽量在24h内完成实验。否则细胞状态和存活率将会受到一定的影响。
③ 血清管悬液可能会呈现一定程度的浑浊状态，这属于正常现象，请放心操作。
④ 将血清管外壁进行常规消毒后，在超净台内小心开盖，尽量避免气泡溢出，轻柔吹打数次，转移至15mL离心管内。
⑤ 吸取1mL 培养基清洗血清管内壁，同样转移至15mL管，并吹打均匀。
⑥ 取20μL细胞悬液至EP管，台盼蓝染色并计数，记录细胞数量和存活率。如有异常请及时与我们联系，如无台盼蓝，可略过该步骤。
⑦ 250g离心5min，收集细胞沉淀，并接种至合适大小的培养器皿中，放置于培养箱内进行培养。
⑧ 24h后镜下拍照并反馈我们，并根据汇合度继续培养或消化传代。