Thermo-最难的实验配最好的抗体——组蛋白PTM研究之精选ChIP抗体
蛋白研究最难的实验是啥？
如果从
WB, IHC, ICC, IF, IP, Co-IP, ChIP
这些实验中选一个，你会选啥？
以上都体验过一遍的同学，大概率会选染色质免疫沉淀（ChIP）。这细胞核里面缠缠绵绵的蛋白和核酸的相互作用，真是让人又爱又恨，爱的是做出来很让文章着实上一个level，恨的是步骤繁琐，并且好用的抗体也是凤毛麟角。
如果您想要了解H3K9me2蛋白在基因组上结合的位置，您需要确保仅沉淀二甲基（me2）标记而不是单甲基（me1）或三甲基（me3）标记。严格意义上来讲识别H3K9me2的抗体有1/10的概率会同时识别H3K9me1，如果抗体不特异，将误导您对H3K9me2的理解。所以此处使用的“多肽序列验证”方法，设计了包含384个来自组蛋白N端尾部并包含59个翻译后修饰位点的多肽。
对比结果如下：
结果显示Invitrogen的H3K9me2抗体（货号：710796）在特异性上优于其他品牌（图1 A/B），
并且功能分析实验中（图1 C）Invitrogen的H3K9me2抗体对已报道的阳性对照（PABPC1和cFOS）的扩增效果更优，阴性对照（SAT2和SATa）无较大差别。
今天给大家推荐的是经过多肽序列验证过的组蛋白翻译后修饰（PTM）抗体。
包括以下几种翻译后修饰类型：
✦ 甲基化—一个、两个或三个甲基被引入到赖氨酸或精氨酸中。在组蛋白的情况下，指组蛋白甲基转移酶（HMT）对组蛋白残基和单、二或三甲基化具有特异性。
✦ 乙酰化—来自乙酰辅酶A的乙酰基通过组蛋白乙酰转移酶（HAT）被引入特异性组蛋白赖氨酸残基中，并且可通过特异性组蛋白去乙酰化酶（HDAC）去除乙酰基。乙酰化通常与基因活化有关。
✦ 磷酸化—激酶使组蛋白上的特异性丝氨酸、苏氨酸或酪氨酸磷酸化，并且可通过磷酸酶进行去磷酸化。磷酸化通常发生在DNA修复和有丝分裂期间。
表1.Invitrogen经多肽序列验证过的组蛋白PTM抗体（部分）