1 玻片芯片的操作

• 芯片的操作与ELISA操作相似，首先加封闭液将芯片封闭，抽去封闭液后加样品孵育、清洗、加二抗孵育、清洗、加荧光剂，清洗后扫描即完成实验操作过程。玻片、芯片可以使用全自动芯片操作仪进行操作和清洗，减少人工操作误差。

A 玻片的干燥

• 将玻片芯片从盒子中取出来，在室温平衡20-30min后，将包装袋打开，揭开密封条，然后将芯片放在真空干燥器或者室温干燥1-2小时，干燥不完全信号点可能会产生拖尾现象。

B 样品的准备

• 玻片芯片非常灵敏，吸附性很好，样品基质或者其中的杂质非常容易引起玻片背景高，所以样品要首先离心，最好是10000rpm 冷冻离心5min，将杂质沉淀或者一些油脂层离心去掉，只抽取清亮的样品。

• 对于血清，要避免溶血，溶血的血清在玻片上会引起很高的背景，且可能影响部分因子的检测结果。

• 细胞培养上清，一般建议收集低血清培养基，可含有低于2%的FBS。

• 由于玻片的强吸附性，细胞裂解液和组织裂解液在玻片上最容易引起较高的背景，所以夹心法玻片芯片一般推荐2mg/ml以上蛋白浓度的细胞和组织裂解液，且要稀释5-10倍后上样,建议上样浓度为500ug/ml。

C 玻片芯片的孵育和清洗

• 所有需要相互比较的样品，要在同一次相同条件的试验中一起完成，如果样品量太大，无法一次操作完成时，需要做一个参照样品，且尽量保持两次或者几次试验的条件完全一致；

• 操作实验时候，请戴上橡胶手套（不掉粉末），以免污染试剂和玻片；

• 样品和试剂加样过程中，保证样品和试剂快速的覆盖住玻片，试验过程中不能使玻片干燥；

• 孵育过程中避免产生气泡；

• 孵育和初次样品清洗时避免附近孔的交叉污染，邻近孔的液体避免溢出污染；

• 玻片芯片的每次清洗都要将液体吸干净，不要残留在角落，尤其是清洗样品的时候，一定要吸干净，否则残留样品会引起高的背景。

  

  
  

D 玻片芯片拆框架和扫描

• 不能触摸玻片的正面，因为玻片芯片非常灵敏，只能接触玻片的边缘，将玻片两侧的搭扣边拆开后，从玻片芯片的底部开始将框架和玻片分离，手不能接触到有芯片的地方。
  

E 膜芯片的孵育和清洗

• 所有需要相互比较的样品，要在同一次相同条件的试验中一起完成，如果样品量太大，无法一次操作完成时，需要做一个参照样品，且尽量保持两次或者几次试验的条件完全一致；

• 用镊子来进行膜的操作，用镊子夹住膜的边缘或者用镊子托起膜，避免夹在膜上有抗体的地方，膜比较脆，容易夹破，操作过程要保持轻柔；

• 整个试验过程中膜芯片不能干燥；

• 避免用手、枪头、或者任何尖锐的工具接触到膜；样品或者试剂要将膜全部覆盖，孵育过程中要将孵育盒的盖子盖上，可以使用塑料薄膜包住孵育盒，避免灰尘和样品的蒸发；

• 加样和孵育过程中避免气泡。

F 膜芯片显色和拍照

• 在加发光剂的时候，要快速的将发光剂覆盖住整个膜，且拿在手上不断摇晃2min，保证发光剂覆盖均匀（如果是胶片压片，保证发光剂浸到膜的每个角落，且覆盖均匀）；

• 所有一批试验的样品（或者一个组分的样品，这些样品要在一起比较）要保证相同的曝光时间（最好在同一张塑料片上同时拍照或者同一张胶片上一起压片），不能一次完成，一定要保证同样的反应时间和曝光时间。

  

目录合集：

一、什么是蛋白质芯片：http://www.ny-bio.com/cn/nd.jsp?id=1535&id=1535

二、蛋白质芯片是如何产生的：http://www.ny-bio.com/cn/nd.jsp?id=1536&id=1536

三、蛋白质芯片有什么优点：http://www.ny-bio.com/cn/nd.jsp?id=1537&id=1537

四、蛋白质芯片都有哪些分类：http://www.ny-bio.com/cn/nd.jsp?id=1538&id=1538

五、蛋白质芯片的应用有哪些方面：http://www.ny-bio.com/cn/nd.jsp?id=1539&id=1539

六：蛋白质芯片的原理是什么：http://www.ny-bio.com/cn/nd.jsp?id=1540&id=1540

七：蛋白质芯片适合检测什么样品，该如何收集样品：http://www.ny-bio.com/cn/nd.jsp?id=1541&id=1541

八：膜芯片都有哪些方法对结果进行拍照：http://www.ny-bio.com/cn/nd.jsp?id=1542&id=1542

九：玻片芯片都要哪些仪器可以扫描结果：http://www.ny-bio.com/cn/nd.jsp?id=1543&id=1543

十：蛋白质芯片的结果可以保存吗：http://www.ny-bio.com/cn/nd.jsp?id=1544&id=1544

十一：蛋白质芯片操作复杂吗，有哪些注意事项：http://www.ny-bio.com/cn/nd.jsp?id=1545&id=1545

十二：蛋白质芯片得到的大量数据该如何处理：http://www.ny-bio.com/cn/nd.jsp?id=1546&id=1546

十三：Raybio芯片常见疑问：http://www.ny-bio.com/cn/nd.jsp?id=1547&id=1547

十四：蛋白质芯片的实物图：http://www.ny-bio.com/cn/nd.jsp?id=1548&id=1548

十五：Raybio芯片新技术介绍：http://www.ny-bio.com/cn/nd.jsp?id=1549&id=1549

十六：使用Raybio芯片产品中国部分参考文献：http://www.ny-bio.com/cn/nd.jsp?id=1550&id=1550