四正柏：CD45荧光素家族再添新成员
随着流式技术的发展，流式细胞仪的激光器从蓝、红两光不断增加至紫光、黄光等，检测通道随之增多，丰富了配色方案，能满足同时检测多个指标的需求，为科研和临床提供了极大便利。
而CD45作为白细胞标记物，是整个免疫学研究中最基础的染色指标，常出现在各种panel中，用于鉴别各类白细胞，如白血病免疫分型、TBNK淋巴细胞亚群分析等。为便于配色，四正柏开发出新荧光素的CD45抗体：CD45-BZY500、CD45-BZY515。
【光谱分析】
分析CD45-BZY500、CD45-BZY515的光谱，激发波谱表明均为405nm紫光激发。
CD45-BZY500的最大发射波谱为500nm，CD45-BZY515的最大发射波谱为515nm，与V500发射波谱接近。单染验证抗体在各紫光通道中的荧光情况，选择V500通道作为接收通道。
【荧光强度分析】
那么CD45-BZY500、CD45-BZY515在染色中的表现如何呢？我们分别用这两种抗体分析人外周血样本中的淋巴、单核、粒细胞，以CD45-V500作为对照。结果发现，CD45-BZY500、CD45-BZY515可以准确分析外周血中的白细胞亚群，且荧光强度优于CD45-V500。
【荧光溢漏差异分析】
以NovoCyte型号的流式细胞仪为例（参数如下），分析BZY500与BZY515对其他荧光通道的影响。
相同点:CD45-BZY500、CD45-BZY515在PO、Qdot 605、Qdot 655、Qdot 800上都有荧光溢漏，CD45-BZY500的补偿更小。
不同点:CD45-BZY500对PB通道影响较大，CD45-BZY515在FITC通道有溢漏。
分别使用CD45-BZY500、CD45-BZY515与CD3-PB、CD19-FITC混染验证荧光溢漏及补偿调节。
使用CD45-BZY500混染，对CD19-FITC分群无影响，但影响CD3-PB阳性细胞群的区分。调节补偿后，可以区分CD3+细胞群，但需要较大的补偿，分群效果不及CD45-BZY515混染。
与CD57-PB混染再次验证，同样发现调节补偿后CD57-PB分群效果不如CD45-BZY515混染组。表明CD45-BZY500与PB荧光素无法同时使用，不便于调节荧光补偿。
使用CD45-BZY515混染，对CD3-PB无影响，但影响CD19-FITC细胞分群。调节补偿后，可以正常区分CD19+细胞群，分群效果与CD45-BZY500混染无明显差异。
配色建议：
(1) CD45-BZY500/515为紫光激发的荧光素，检测通道与V500荧光素相似,避免与V500荧光素同时使用；
(2) panel中无PB时，优选CD45-BZY500；
(3) panel中含有PB时，建议选择CD45-BZY515。
【抗体信息】
【技术服务】
四正柏作为免疫学核心试剂厂家，除了提供流式抗体外，也提供相关的技术服务。针对目前新推出的BZY500、BZY515荧光素，可提供抗体（蛋白）标记服务，为工业客户提供更多支持。