免疫组化(Immunohistochemistry,IHC)是一种用于检测组织中特定抗原蛋白的方法。通过使用特异性抗体结合组织切片中的蛋白质抗原,IHC可以帮助识别和定位细胞和组织中的特定蛋白质。这项技术广泛应用于生物医学研究和临床诊断中,可用于检测肿瘤标志物、免疫细胞浸润、组织分化状态等,并提供了对组织形态和生物标志物表达的有价值信息。
HRP酶显色系统:
辣根过氧化物酶(horseradish peroxidase,HRP)是一种过氧化物酶,它能将双氧水分解为氧气和水,HRP可用DAB作为供氢体,H2O2作为底物,最终使抗原抗体结合的终产物呈棕黄色。这样,DAB的显色反应可以帮助可视化地检测出组织中特定抗原的定位和表达水平。
AP酶显色系统:
碱性磷酸酶(Alkaline Phosphatase,AP)是一种常用的标记酶。在这个系统中,当AP酶与特定底物反应时,产生的产物会显色,从而可视化酶的活性。在AP的催化下,萘酚AS-MX磷酸酯被水解为萘酚,萘酚和快红试剂起偶联反应,在AP的活性部位形成红色的不溶性沉淀,称为快红染色。以双染体系来说,快红染色效果更好,一是结合牢固,二是更易和DAB及苏木素区分。
正能上新-免疫组化双染试剂盒
随着临床以及科研需求的增多,有时需要在一张组织切片上同时检测两种蛋白,例如应用于宫颈癌诊断的p16/ki-67双染检测。正能的免疫组化双染试剂盒,在组织切片上通过使用辣根过氧化酶(HRP)和碱性磷酸酶(AP)标记来检测不同抗原的表达。利用这种双染法,可以在同一切片上同时观察两种不同抗原的位置和表达情况,有助于更全面地了解组织中不同蛋白质的分布和相互关系。这种技术在研究和临床诊断中具有重要的应用价值。
免疫组化双染示意图
HRP(Mouse)& AP(Rabbit) IHC Detection Kit(Dual Staining)
免疫组化双染试剂盒
检测原理
首先,一抗(鼠源)与靶点抗原I结合,HRP标记的抗鼠聚合物二抗与一抗(鼠源)结合,通过DAB染色液显色呈棕色,对抗原I进行定性定位。同时,一抗(兔源)与靶点抗原Ⅱ结合,AP标记的抗兔聚合物二抗与一抗(兔源)结合,通过快红染色液显色呈红色,对抗原Ⅱ进行定性定位。
产品优势
实验步骤少,比传统染色方法的操作时间短
包含两种显色系统,可全景展示多个抗原靶点
色相对比鲜明,易于结果判读
二抗采用微聚合物技术,确保了试剂的高灵敏度
非生物素标记的一步法免疫组化检测技术,特异性强