小伙伴们都知道WB实验有多么得耗时费力!
可如果直到显影后才发现实验结果出现:
蛋白条带异常、内参不平、转膜有气泡……
等等恼人的问题
这绝对会让人武则天守寡——失去理智!
那有没有办法能在转膜前,
就提前知道蛋白电泳条带是否异常,
避免走后面的冤枉路呢
您还别说,
小雅今天就带来了一款秘密武器,
可以完美解决这个问题!
它就是WB实验绝佳辅助——
【点击试用】
这款产品制备的PAGE凝胶实现了蛋白质在凝胶中的可视化(紫外光下),无需额外的染色和脱色步骤,而且在转印后的膜上依然可见,同时也不会干扰电泳或下游实验步骤。
实验效果如下图所示:
手机拍摄的电泳后凝胶图像
紫外凝胶成像仪拍摄的电泳后凝胶图像
紫外凝胶成像仪拍摄的转印后NC膜图像
图中为在同一电泳槽中同时电泳后两块免染凝胶的紫外成像图
上方为雅酶免染凝胶
下方为进口B品牌免染凝胶
可见二者实验效果基本相同
下面咱们就来看看这款神器如何帮助大家在转膜前判断电泳结果:
免染PAGE凝胶电泳结束后,紫外曝光成像可直接观察凝胶上的蛋白条带,如果出现以下结果,就可以及时调整优化,重新跑电泳了,避免接着转膜走冤枉路。
最右侧泳道异常(箭头所指),其它泳道正常,该样本未充分处理,导致蛋白迁移异常。
如上样量40μg和60μg泳道所示,上样量过高时,蛋白电泳条带出现明显拖尾竖纹。
此外,免染PAGE凝胶还可以帮助大家获知转膜效率:
通过观察转印后的凝胶及膜上蛋白条带,即可判断转膜效率,并发现转膜过程中的一些问题,如产生气泡等。
图一为转印后凝胶(上)和转印膜(下)的紫外成像图,可以观察到凝胶中仍残留有大量蛋白未转印到膜上,提示下次转膜可以延长转膜时间。
转印后,膜上的蛋白紫外成像图显示泳道变形,有气泡,转膜质量不佳。
最后,免染PAGE凝胶还可以用于总蛋白内参归一化定量,使用免染总蛋白作为上样内参,可以确保目标蛋白和上样内参均在线性动态范围内,完全消除管家蛋白作为蛋白免疫印迹上样内参所固有的一些问题。
这个方面今天就不讨论了,以后咱们再写篇文章详细探讨。
A:不会影响蛋白与抗体的结合,例证如下。
Q:使用免染PAGE胶电泳需要购买专门的电泳缓冲液吗?
A:本试剂盒配制的免染PAGE凝胶无需搭配专门的电泳缓冲液,直接使用常规的Tris-Glycine电泳缓冲液即可,但成像步骤需要用到紫外光成像仪。
Q:跑胶结束后可以与玻璃板一起放入成像仪中拍照吗?
A:注意一定要把胶从玻璃板中取出,再放入紫外光成像仪拍照,否则玻璃板会阻碍紫外光激发免染胶发出荧光,而导致拍照失败。
除了可免染成像,一步法免染PAGE凝胶快速制备试剂盒 还完美继承了雅酶常规配胶试剂盒的所有优点,具体如下:
一步法灌胶
灌制下层胶后直接注入上层胶,无需液封;
操作简单快速
制胶无需计算所需溶液量,无需稀释;
彩色上层胶
可制备红蓝绿三种颜色的上层胶,为点样和区分不同凝胶提供便利;
避免异味
无需使用TEMED,避免恶臭气味;
条带清晰
尤其小分子蛋白质条带比在传统凝胶中更清晰。
最关键的问题来了,
说了这么多优点,
雅酶 免染PAGE凝胶快速制备试剂盒
比常规制胶试剂盒肯定贵了不少吧?
提质不加价
花常规制胶试剂盒的价格,
免染PAGE凝胶快速制备试剂盒
就能到手啦!!!
货号 | 名称 | 规格 | 价格 |
PG220 | Omni-Easy™一步法免染PAGE凝胶快速制备试剂盒(6%) | 125gels | 338元 |
PG221 | Omni-Easy™一步法免染PAGE凝胶快速制备试剂盒(7.5%) | ||
PG222 | Omni-Easy™一步法免染PAGE凝胶快速制备试剂盒(10%) | ||
PG223 | Omni-Easy™一步法免染PAGE凝胶快速制备试剂盒(12.5%) | ||
PG224 | Omni-Easy™一步法免染PAGE凝胶快速制备试剂盒(15%) | ||
PG120 | 免染PAGE凝胶快速制备试剂盒(6%) | 125gels | 318元 |
PG121 | 免染PAGE凝胶快速制备试剂盒(7.5%) | ||
PG122 | 免染PAGE凝胶快速制备试剂盒(10%) | ||
PG123 | 免染PAGE凝胶快速制备试剂盒(12.5%) | ||
PG124 | 免染PAGE凝胶快速制备试剂盒(15%) |