比siRNA更稳定有效下调基因的技术--Morpholinos

   美国 Gene Tools 公司全球首家研制，生产和销售 Morpholino Anti-sense oligos（反义寡核苷酸)，专用于基因调控的科学研究和药物开发。由多位拥有美国博士学位的资深科学家组成，我们的客户服务部门为全球客户提供免费的技术咨询和 Morpholinos 序列设计服务。

    Morpholinos 作为基因调控研究的最佳工具， 已被广泛用于：

• 阻断靶 mRNA 翻译 (下调基因）

• 诱导 RNA 选择性剪接 (下调或上调基因）

• 阻断 miRNA

• 阻断病毒 RNA

• 阻断 non-coding RNA

美国 FDA 加速批准了四个个治疗杜氏肌营养不良症（DMD）的 Morpholinos 新药 eteplirsen, casimersen, golodirsen and viltolarsen。此外还有数种 Morpholinos 新药在美国进入临床前期研发阶段，用于治疗新冠病毒感染，癌症治疗，流感( Influenza)病毒等。Morpholinos 的基本原理是用一个吗啉环（morpholino）取代核苷酸上面的糖环；同时将负电荷的磷酸基团改变成不带电荷的磷酰二胺骨架；以碱基配对的方式与靶 RNA 单链稳定结合，从而阻断靶 RNA 的功能。Morpholinos 技术已被广泛用于各种 RNA 功能和基因调控研究。发表于国际科学期刊的Morpholino 论文已经超过 12200 篇。

Morpholinos 属于第三代反义寡核苷酸， 由Gene Tools 公司独家研制、 开发和提供合成服务。

Morpholinos 主要通过阻断蛋白质翻译过程而达到抑制目标基因功能的作 用，目前已经广泛用于发育生物学和细胞学实验中， 并取得了非常好的实验效 果。

Morpholinos 具有以下几个特点：

①与其他类型的反义寡核苷酸相比，Morpholinos 能更好地抵抗核酸酶的作用；

②Morpholinos 与靶序列结合后通过空间位阻效应发挥作用， 不激活 RNaseH， 不引起目标基因mRNA 的降解 ；

③针对翻译起始位点区设计的Morpholinos 用于抑制蛋白质的翻译，针对 pre-mRNA 剪切位点区设计的Morpholinos 可影响mRNA 剪切，得到不同的转录本，可以方便地用于目标基因结构域的突变研究；

④与靶序列结合能力强，可以渗入mRNA 的二级结构， 并且特异性好。

配合Morpholinos 的使用，Gene Tools公司开发了相应的输送系统，可 以安全、高效地将Morpholinos 输送至胞浆内，因此，Morpholinos 也可以用于 遗传学研究和新药靶标的发现以及验证。此外，Morpholinos 可以标上荧光基 团、亲和标签以及活性反应基团，以供不同的研究需要。

★2-3周超快货期

★使用Morpholino的国际科学期刊论文已经超过 7000篇。

   ★Gene Tools网站提供Morpholino的相关文献数据库： http://pubs.gene-tools.com

• Gene Tools公司全球独家研制和销售 ，根据客户特定需要而定制。

• 用于基因调控和RNA功能的科学研究和药物开发。

2、Morpholinos适用的领域

任何对基因功能研究和 RNA 功能研究，使用分子生物学工具的实验室

•最为广泛使用：发育生物学（斑马鱼等） •癌症研究 •神经生物学

•免疫学 •细胞生物学 •病毒研究

•药物开发 • 生物技术公司

3、Morpholinos 的应用

a. 临床应用：

数种基于 Morpholinos 的药物在美国进入临床试验阶段 （ Sarepta Therapeutics）

•杜氏肌肉营养不良症 ( Duchenne Muscular Dystrophy):临床试验第三期

•伊波拉(Ebola) 病毒，临床试验第一期

•马儿堡（Marburg) 病毒：，临床试验第一期

•流感( Influenza) 病毒：临床试验第一期

•抵抗超级细菌：临床前期

•治疗老人痴呆症：临床前期

•癌症治疗：临床前期

•治疗脊髓性肌肉萎縮症 SMA ：临床前期

•病毒，细菌诊断：基因芯片

b. 生命科学研究 :

适用于所有模式生物基因调控和 RNA 功能研究：

•动物模型：小鼠，大鼠，狗，灵长类等

•胚胎模型：斑马鱼，爪蟾，鸡，鼠，绵羊等的胚胎

•细胞培养：动物细胞，原代细胞，神经细胞，癌症细胞等

•器官培养

• 植物，细菌，病毒，藻类 等等

•发表于国际科学期刊的 Morpholino论文已经超过 7000 篇！

4、Morpholinos 精准阻断任何靶 RNA，是基因调控和 RNA 功能研究的最佳工具

a.基因下调（最常用）：

阻断靶基因的蛋白合成：通过精准阻断靶 mRNA 翻译，不降解靶 RNA

打乱靶基因的蛋白合成的序列：通过改变靶 RNA 的剪接

b. 基因上调：

去除抑制靶基因蛋白合成的分子：通过改变靶 RNA 的剪接

•治疗杜氏肌肉营养不良症 ( Duchenne Muscular Dystrophy) ，美国第三期临床试验中

• 治疗脊髓性肌肉萎縮症 SMA

c 抗病毒：精准阻断病毒 RNA

伊波拉 (Ebola) 病毒，马儿堡（ Marburg)病毒， 流感 ( Influenza) 病毒，HIV 病毒， 乙肝病毒，等等

d. 阻断非编码 RNA（ non-coding RNA ）

miRNA ， lncRNA， 3’UTR， 5’UTR 等

e. 抵抗细菌：阻断细菌的

5.Gene Tools 产品简介

相较于 RNAi 等其他反义技术，Morpholinos 具有以下优点：

• 极强的稳定性: 不被任何酶所识别降解，包括脱氧核糖核酸酶和核糖核酸酶。

• 无毒副作用：不激活细胞干扰素的分泌和免疫应答。

• 对靶 RNA 特异性高: 标准的 Morpholinos 含 25 个序列，比其他反义技术的序列长。

• 不引发靶 RNA 被降价：不带电荷，不与蛋白结合，不激活核糖核酸酶 H 和 RISC 等 RNA降解系统。

• 适用于多种生物研究模型：动物模型（小鼠，大鼠，狗，灵长类等），胚胎模型(斑马鱼，爪蟾，鸡，鼠，绵羊等），细胞培养，器官培养等。

根据不同生物研究模型的特定需求，我们提供多种产品：

1. Morpholinos (PMO）适用于细胞培养，胚胎模型和试管内方式实验。需要使用辅助导入细胞的操作:

胚胎模型: 通过显微注射把 Morpholinos 直接注射入胚胎细胞内。

细胞培养：使用 Gene Tools 创新研发的转染试剂 Endo-Porter， 或电转染

In vitro 试管内方式：直接使用 Morpholinos 的末端可以添加荧光标记、同位素标记，亲和反应基团，或辅助导入细胞的基团等。

2. Vivo-Morpholinos 适用于活体动物模型（小鼠，大鼠，狗，灵长类等），细胞培养，器官培养等。Vivo-Morpholinos 的末端已含有辅助导入细胞的基团，不需要其他导入细胞的操作。操作简单方便，效率最高。末端可以添加荧光标记或与 Click 化学反应兼容的叠氮化物（Azide）。

细胞培养和器官培养：直接加入到培养液中。

活体动物模型：静脉注射 (IV)，侧脑室注射（ICV），腹腔注射(IP) 局部器官注射：脑内显微注射, 肌肉注射等。

* 绿色荧光素标记的Vivo-Morpholino用于通过荧光显微镜检测Vivo-Morpholino递送的工具。可提供定制序列和预制的标准阴性对照Standard Control序列。

用于成体生物的可注射 Morpholino 寡聚物

我们的细胞膜递送装置可将共价连接的 Morpholino 寡核苷酸从细胞外空间送入细胞的细胞膜和细胞核，从而在体内实现裸反义制剂以前无法实现的效果。Morpholino 寡核苷酸在胚胎中的所有功能--阻断翻译、改变剪接和抑制微 RNA 成熟--现在都可以在成年动物中实现。

* * Azide Modified Vivo-Morpholino叠氮基-Vivo-Morpholino在Vivo-Morpholino的5‘端含有一个叠氮基官能团 （Azide）。叠氮基- Vivo-Morpholino可以通过Click化学进一步修饰。

3. PPMOs （Cell-Penetrating Peptide-Conjugated Morpholinos） 根据特定需求合成细胞穿透肽偶联的 Morpholino。适用于活体动物模型（小鼠，大鼠，狗，灵长类等），细胞培养，器官培养等。

Cell-Penetrating Peptide已被用于在细胞内向细菌和哺乳动物细胞。

Cell-Penetrating Peptide已被研究人员广泛使用，并在治疗遗传疾病的临床试验中进行测试。用于治疗脊髓性肌肉萎缩症等遗传疾病的临床试验中。

4. Endo-Porter Gene Tools 创新研发的转染试剂，有效地将 Morpholinos， 短肽或小分子蛋白（ 70 kD 以下）等转染入细胞质和细胞核内。适用细胞培养。

6.Vivo-Morpholinos 简介

末端已含有辅助导入细胞的基团，不需要其他导入细胞的操作（即 无需转染试剂）。操作简单方便，效率最高。

•细胞培养和器官培养：直接加入到培养液中。

•活体动物模型：静脉注射 (IV)，侧脑室注射（ICV），腹腔注射(IP)。

• 局部器官注射：脑内显微注射, 肌肉注射等。

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