什么是细胞转染？

    细胞转染是指将外源分子如DNA，RNA等导入真核细胞的技术。随着分子生物学和细胞生物学研究的不断发展，转染已经成为研究和控制真核细胞基因功能的常规工具。在研究基因功能、调控基因表达、突变分析和蛋白质生产等生物学试验中，其应用越来越广泛。

转染方法

脂质体转染法

    阳离子脂质体表面带正电荷，能与核酸的磷酸根通过静电作用，将DNA分子包裹入内，形成DNA脂复合物，也能被表面带负电的细胞膜吸附，再通过融合或细胞内吞进入细胞。脂质体转染适用于把DNA转染入悬浮或贴壁培养细胞中，是目前实验室最方便的转染方法之一，其转染率较高，优于磷酸钙法。由于脂质体对细胞有一定的毒性，所以转染时间一般不超过24小时。常用细胞类型：cos-7 、BHK、NIH3T3 、Hela等。

电穿孔转染法

    电流能够可逆地击穿细胞膜形成瞬时的水通路或膜上小孔促使DNA分子进入胞内，这种方法就是电穿孔。当遇到某些脂质体转染效率很低或几乎无法转入时建议用电穿孔法转染。一般情况下，高电场强度会杀死50%-70% 的细胞。现在针对细胞死亡开发出了一种电转保护剂，可以大大的降低细胞的死亡率，同时提高电穿孔转染效率。

病毒感染

    对于脂质体转染与电穿孔转染都无法成功转染的细胞系建议用病毒感染，此法可以快速100%感染，检测成功率高。

一、雅酶蛋白过表达试剂盒

转染效率高

可在含血清与抗生素的完全培养基中转染，在有无血清的条件下均可发挥作用

细胞毒性低

独特的组合配方最大程度减少对细胞的损伤，保持细胞活性适用范围广

用于大多数常见的哺乳动物细胞系的 DNA 转染，如悬浮细胞(CHO-S、Expi293F、HEK293F、HEK293S 等),贴壁细胞(HEK293T、Hela、NIH/3T3、MCF-7、CHO-K1、Hep G2、COS-1、COS-7 等)

适配性强

无需使用特定培养基稀释转染试剂，使用培养细胞所用的同种培养基(不加血清) 即可

操作便捷

操作方法与传统转染方法一致，且细胞转染后无需换液，只需添加表达增强剂即可

实验结果分享

分别使用ZC101和Lipo2000在相同细胞数的Expi293F和CHO-S细胞系中转染相同质量的GFP表达质粒。转染后36h，使用流式细胞仪检测细胞的GFP蛋白表达阳性率。

结果表明：如图1所示，对于两种不同的悬浮细胞系，使用ZC101过表达GFP的细胞阳性率显著高于Lipo2000。

图1，悬浮细胞系中GFP蛋白表达的流式细胞术检测结果

接下来，使用ZC101和Lipo2000在相同细胞数的不同种类贴壁细胞中过表达GFP蛋白，36h后使用荧光显微镜观察蛋白表达情况。

结果表明：如图2所示，在Hela和HEK293T细胞系中，ZC101和Lipo2000的效果旗鼓相当；而在COS-7、MCF-7、NIH/3T3和HepG2细胞系中，使用ZC101的GFP表达效果显著优于Lipo2000。

图2，贴壁细胞系中GFP蛋白表达的荧光显微镜观察结果

最后，在不同的细胞系中使用ZC101和Lipo2000过表达胞内蛋白GFP，跨膜蛋白KCNQ4，以及分泌蛋白蛋白MBP。36h后，取相同体积的细胞裂解液或细胞上清通过标签抗体进行WB检测。

结果表明：如图3所示，在Hela和HEK293T细胞系中，蛋白表达量相差不大；而在Expi293F、CHO-S、NIH/3T3、Hep G2、COS-7和MCF-7细胞系中，与Lipo2000相比，使用ZC101过表达蛋白量更高；综合比较，使用ZC101的平均蛋白表量高于Lipo2000。

图3，不同细胞系过表达蛋白后的WB检测结果

质粒图谱分享：

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二、四正柏   UltraFection高效转染试剂

Ultra Fection 2.0

【适用范围广】适用于绝大多数细胞系，有血清和无血清培养基，瞬时转染和稳定转染。

【高效低毒】转染效率高，细胞活性更高。

【操作方便】转染后无需换液

【性价比高】进口品质，价格优惠。

    UltraFection 2.0是一款新型的非脂质体聚合物转染试剂，应用于体外高效转染，细胞毒性低，适用于含血清的培养基，特别适于大量高表达蛋白的 DNA 转染、高通量筛选 cDNA 芯片和 shRNA 文库等。UltraFection 2.0 可高效富集 DNA，通过内吞作用将 DNA 摄入胞内，具有结合保护 DNA 能力强，毒性低的特点，适用于以下常规细胞系:CHO、HEK293、293F悬浮细胞、Hela、COS-7、NIH3T3、MEF、 U2OS等.

Fig1:293F 悬浮细胞转染，转染后72小时lgG阳性细胞百分率。用UlraFection 2.0和293Fection 将不同量的人lgG-GPI质粒转染293F悬浮细胞，转染72小时后，用抗人lgG-FITC标记抗体流式分析表达lgG的细胞数量。		Fig2:lgG表达载体瞬时转染CHO-K1细胞系。表达俩个不同单克隆抗体的质粒转入CHO-K1细胞系，转染后3天和6天用Octet平台测细胞培养上清中lgG滴度。

文献引用

Lu‐Lu Liu, Lei Liu, Hai‐Hui Liu, etc. Levamisole suppressesadipogenesis of aplastic anaemia‐derived bone marrow mesenchymal stem cells through ZFP36L1‐PPARGC1B axis. Journal of Cellular and Molecular Medicine.Published online:11 July 2018（IF:4.658）

引用产品: Ultra Fection 2.0 transfection reagent作者单位: 济宁医科大学附属医院中心实验室

XianningZhang, LuluLiu, CuiyunDou, etc. PPAR Gamma-Regulated MicroRNA 199a-5p Underlies Bone Marrow Adiposity in Aplastic Anemia.Molecular Therapy-Nucleic Acids.Published online:19 July 2019. (IF:5.919）

引用产品: Ultra Fection 2.0 transfection reagent作者单位: 济宁医科大学附属医院中心实验室

UltraFection 3.0

【高转染效率】【低毒性】【可用于含血清培养基】【操作简单，无需换液】【适用范围广】【性价比高】【可转siRNA】

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三、康为转染试剂

线性PEI转染试剂   货号：CW9309

产品简介

    PEI 40000是一种分子量为40000的高电荷阳离子聚合物，非常容易结合带负电荷的核酸分子，形成复合物，并使该复合物进入细胞中。PEI 40000是一种细胞毒性低，转染效率高的转染试剂，在HEK293和CHO等细胞中基因表达效率较高。目前已经验证线性PEI转染试剂广泛适用于多种细胞系包括HEK-293、HEK293T、CHO-K1、Sf9和 Hela细胞等，转染效率高达80%~90%。 PEI 40000与PEI 25000转染试剂相比，具有显著优势：

1. 溶解性高：PEI 40000较易溶解，可以直接在水中溶解，而PEI 25000需要先把水调成弱酸性以助其溶解，溶解后再用NaOH把pH调至中性。

2. 无残留物：PEI 40000无丙酰基残留，这意味着它更易于与DNA结合，而PEI 25000含有 4-11% 的丙酰基残留，这些残留物可能会阻止聚合物主链与 DNA 结合。

3. 结构优势：PEI 40000是完全脱落的结构，因此其性能始终高效稳定，重复性好。

4. 转染效率高：PEI 40000的转染效率比PEI 25000高，可以完全替换PEI 25000。

5. 操作简便：PEI 40000操作简便，更易于使用，且比PEI 25000的转染效果好。

CW通用转染试剂   货号：CW9302

产品简介

    该转染试剂是一种新型的阳离子脂质体转染试剂。适合于将核酸(DNA和RNA)转染入真核细胞，具有低细胞毒性；对多种类型的细胞和培养板都具有高转染效率；转染时血清的存在不影响转染效率等优点。

CW质粒转染试剂   货号：CW9301

产品简介

    该试剂的核心组分为阳离子聚合物，转染原理利用带正电的聚合物与核酸分子中带负电的磷酸基团结合，形成带有正电荷的复合物。该复合物与细胞表面带有负电荷的蛋白多糖发生相互作用，并通过胞吞作用顺利进入细胞内部。本品具备多项优势，包括高效的转染性能、较低的细胞毒性、简便的操作流程、良好的重复性，以及广泛的适用范围。

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