研究摘要

类风湿关节炎（RA）是一种自身免疫性疾病，其特征是关节炎症和破坏，主要由成纤维样滑膜细胞（FLSs）的肿瘤样表型和免疫刺激作用驱动。本研究通过高通量筛选（HTS）方法，从144个C2结构域中鉴定出PLCη2的C2结构域（PLCη2_C2）为RA FLSs的关键调控因子。研究发现，PLCη2及其C2结构域通过抑制HRAS-RAF1相互作用，多因子磷酸化检测发现互作后通过下调NF-κB、JAK-STAT和MAPK信号通路，从而抑制RA FLSs的增殖、迁移、侵袭和炎症反应。此外，PLCη2在RA患者滑膜组织和FLSs中表达下调，提示其可能作为RA治疗的潜在靶点。

1. PLCη2_C2抑制RA FLSs的肿瘤样表型

通过功能筛选，PLCη2_C2被鉴定为能够显著抑制RA FLSs增殖和NF-κB活性的关键结构域。过表达PLCη2_C2可减少FLSs的迁移、侵袭和炎症因子（如IL-6、MMPs）的分泌。

2. PLCη2在RA患者中表达下调

与骨关节炎（OA）相比，RA患者的滑膜组织和FLSs中PLCη2的蛋白和mRNA表达水平显著降低。炎症刺激（如IL-1β、TNF、LPS）进一步抑制PLCη2的表达，提示其在RA病理中的保护作用。

3. PLCη2通过HRAS-RAF1相互作用调控下游信号通路

使用RayBiotech磷酸化检测NF-κB、JAK-STAT和MAPK信号通路的磷酸化蛋白水平。结果显示，PLCη2过表达显著抑制了这些通路中关键蛋白的磷酸化，包括pERK、pSTAT3和pNF-κB。

NF-κB通路：PLCη2抑制IL-1β和TG诱导的NF-κB激活（图6e）。

JAK-STAT和MAPK通路：PLCη2通过阻断HRAS-RAF1相互作用，抑制下游ERK和STAT3的磷酸化。

4. PLCη2_C2在动物模型中缓解关节炎

在胶原诱导性关节炎（CIA）小鼠模型中，局部注射Ad-PLCη2或Ad-PLCη2_C2显著减轻关节肿胀、滑膜炎症和骨侵蚀（图7）。同时，关节组织中炎症因子（IL-1β、IL-6）和基质金属蛋白酶（MMP3、MMP13）的表达水平显著降低。