Omni-Easy™速溶型蛋白上样缓冲液(变性,还原型,5×)
产品特点
抑制降解——采用新型配方,确保煮样后pH值为中性,避免蛋白降解,尤其适用于磷酸化蛋白;
快速融化——从-20℃取出后融化速度快,好吸不粘稠;
无 异 味——采用新型还原剂,不含β-巯基乙醇或DTT,无令人不快的臭味。
注:Omni-Easy™速溶型蛋白上样缓冲液变性剂溶解性更高。PH值为8.5,煮蛋白加热PH值会下降到7.0左右,蛋白不会降解。(目前自配的和市面其他品牌的蛋白loading buffer,PH值本身在7.0左右,加热后PH值会下降到4.0左右,有的蛋白会发生少许降解,尤其是磷酸化蛋白)。
部分文献展示:
1)Xiong, Q., Cao, L., Ma, C. et al. Close relatives of MERS-CoV in bats use ACE2 as their functional receptors. Nature (2022).(IF 69.504)
2)Lin, W., Niu, R., Park, S. M., Zou, Y., Kim, S. S., Xia, X., ... & Yin, J. (2023). IGFBP5 is an ROR1 ligand promoting glioblastoma invasion via ROR1/HER2-CREB signaling axis. Nature Communications, 14(1), 1578.(IF 17.694)
3)Zhang, S., Xia, S., Chen, L., Chen, Y., & Zhou, J. (2023). Covalent Organic Framework Nanobowls as Activatable Nanosensitizers for Tumor‐Specific and Ferroptosis‐Augmented Sonodynamic Therapy. Advanced Science, 2206009.(IF 17.521)
4)Zhang, L., Zhu, Y., Wei, X., Chen, X., Li, Y., Zhu, Y., ... & Pang, Z. (2022). Nanoplateletsomes restrain metastatic tumor formation through decoy and active targeting in a preclinical mouse model. Acta Pharmaceutica Sinica B.(IF 14.903)
5)Zhu, J., Sun, R., Sun, K., Yan, C., Jiang, J., Kong, F., & Shi, J. (2023). The deubiquitinase USP11 ameliorates intervertebral disc degeneration by regulating oxidative stress-induced ferroptosis via deubiquitinating and stabilizing Sirt3. Redox Biology, 62, 102707.(IF 10.787)
无蛋白快速封闭液
产品特点:
快速高效——5~10 min快速完成封闭;与传统的脱脂奶粉和BSA封闭相比信噪比更高;
性能可靠——无蛋白配方,与抗体无交叉反应;
应用范围广——无磷酸化蛋白,无生物素,尤其适合磷酸化特异抗体及生物素检测系统。
节省抗体——使用本封闭液后,所需的最适抗体浓度低于常规使用浓度,可大大节省抗体使用量
注意: 没有任何一种封闭剂能适合所有抗原和抗体检测系统。如出现本试剂不适合的抗体,请替换使用其它种类的封闭剂如BSA或脱脂奶粉等。
Q&A
Q:反馈用了无蛋白快速封闭液,实验结果比用脱脂奶粉和BSA更亮,是不是有信号增强的作用?
A:没有信号增强的作用,而是脱脂奶粉和BSA都是蛋白质成分,可能会和膜上的抗原蛋白发生一定的非特异性结合,造成抗体结合抗原蛋白的位点没有那么多。无蛋白快速封闭液因为没有蛋白质成分,不会和膜上抗原结合,只会封阻膜上的空白孔隙,所以结果就更亮。
Q:只要抗体好用,可以不封闭
A:90%多的实验还是会封闭。如果不做封闭可能背景全是漆黑的,两天时间的实验白做了。而且还很费抗体,大多数实验室的一抗都会回收用。
Q:配脱脂奶粉或者BSA也不麻烦,可以不用快速封闭液
A:脱脂奶粉和BSA都是粉末,要称量,溶解,基本不会隔天使用。万一溶解不完全,颗粒吸附在膜上,那实验结果就是一个个大小不一的黑点。无蛋白快速封闭液封闭后,可以不洗膜,直接一抗孵育。用脱脂奶粉或者BSA封闭,需要洗膜才能孵育一抗。
部分文献展示:
1)Liu, Z., Wang, T., She, Y., Wu, K., Gu, S., Li, L., ... & Zhou, Y. (2021). N6-methyladenosine-modified circIGF2BP3 inhibits CD8+ T-cell responses to facilitate tumor immune evasion by promoting the deubiquitination of PD-L1 in non-small cell lung cancer. Molecular cancer, 20(1), 1-25.(IF 41.444)
2)Liu, D., Cao, F., Xu, Z., Zhao, C., Liu, Z., Pang, J., ... & Yang, J. (2023). Selective Organ‐Targeting Hafnium Oxide Nanoparticles with Multienzyme‐Mimetic Activities Attenuate Radiation‐Induced Tissue Damage. Advanced Materials, 2308098.(IF 29.4)
3)Liu, C., Xu, Y., Yang, G., Tao, Y., Chang, J., Wang, S., ... & Zeng, Y. Niche Inflammatory Signal Regulates Periodical Mammary Regeneration and Safeguards Stem Cell Survival Under Cytotoxic Stress. Available at SSRN 4431123.(IF 25.269)
4)Zhao, X., Chen, H., Qiu, Y., & Cui, L. (2022). FAM64A promotes HNSCC tumorigenesis by mediating transcriptional autoregulation of FOXM1. International journal of oral science, 14(1), 1-12.(IF 24.897)
5)Liu, C., Xu, Y., Yang, G., Tao, Y., Chang, J., Wang, S., ... & Zeng, Y. A. (2024). Niche inflammatory signals control oscillating mammary regeneration and protect stem cells from cytotoxic stress. Cell Stem Cell, 31(1), 89-105.(IF 23.9)
通用型抗体稀释液
产品特点:
稳定高效——本产品稀释和配制的抗体可以在4℃保存和使用不少于6个月,并可重复使用;
通用性强——可用于稀释一抗和二抗,适用于Western Blot,IHC及IF等多种实验;
方便快捷——直接用于抗体的稀释,无需添加任何额外的试剂。
注:自配抗体稀释液保存时间不长,且回收次数有限。且脱脂奶粉和BSA都是粉末,需要称量溶解,BSA也不便宜。稀释过的一抗4度保存,即使加了叠氮钠也保存不久,容易长菌。-20度可长期保存,但反复冻融会影响抗体效果。
部分文献展示:
1)Wu, T., Zhang, Y., Han, Q., Lu, X., Cheng, Y., Chen, J., ... & **a, W. (2023). Klotho-beta attenuates Rab8a-mediated exosome regulation and promotes prostate cancer progression. Oncogene, 42(38), 2801-2815.(IF 8)
2)Liu, Y., Yin, S., He, Y., Tang, J., Pu, J., Jia, G., ... & Zhao, H. (2023). Hydroxy-Selenomethionine Mitigated Chronic Heat Stress-Induced Porcine Splenic Damage via Activation of Nrf2/Keap1 Signal and Suppression of NFκb and STAT Signal. International Journal of Molecular Sciences, 24(7), 6461.(IF 6.208)
3)Zhou, C., Wang, G., Jing, W., Tan, X., & Guo, H. (2021). Anticancer Properties and Mechanisms of Singly-Protonated Dehydronorcantharidin Silver Coordination Polymer in a Bladder Cancer Model. Frontiers in pharmacology, 12, 618668.(IF 5.81)
4)Mo, H. Q., Tian, F. J., Ma, X. L., Zhang, Y. C., Zhang, C. X., Zeng, W. H., ... & Lin, Y. (2020). PDIA3 regulates trophoblast apoptosis and proliferation in preeclampsia via the MDM2/p53 pathway. Reproduction, 160(2), 293-305.(IF 3.906)
5)Zhang, W., Yao, J., Chen, C., Wang, J., & Zhou, A. (2023). Fetuin-B Overexpression Promotes Inflammation in Diabetic Retinopathy Through Activating Microglia and the NF-κB Signaling Pathway. Current Eye Research, 1-12.(IF 2)
WB抗体快速剥离缓冲液(温和通用型)
产品特点:
节省样品——同一张膜的相同样品可用于多种检测;
省时——不需重新制胶电泳;
高效快速——去除效果好,远优于自制缓冲液;
温和配方——对转印膜上结合的靶蛋白损伤极微;
无 气 味——无刺鼻气味,更环保。
Q&A:
Q:抗体剥离液是干什么的?为什么需要用?A:需要做A和B两个大小很接近的目的蛋白,因为位置太接近膜没办法剪开,就可以用抗体剥离液,A抗体显影结束,把A一抗和二抗剥离干净,再孵育B抗体,这样同一张膜可以多次印迹。有的期刊,要求两个目的蛋白的实验结果,要在同一张膜上面,不允许分开两张膜孵育抗体。甚至要求内参和目的蛋白要在同一张膜上面,哪怕内参和目的蛋白的位置不是很接近,但是杂志要求是同一张膜。
Q:雅酶的抗体剥离液,膜加进去以后,会变透明,对实验有影响吗?
A:是正常现象。等剥离结束后,用TBS/T或PBS/T漂洗膜,膜上面的预染蛋白Marker条带就会再次出来。
Q:目的蛋白和内参位置很接近,应该先做哪个?
A:建议先做目的条带,目的条带相对好剥,不要先做内参,内参因为表达量很高,剥离内参有难度。
证明抗体剥离干净的方法:
剥离结束后,洗膜封闭,直接孵育二抗,再洗膜,用显影液曝光,不出来条带,就能证明剥离干净了。如果蛋白表达量特别高或者抗体结合力强,需要延长剥离时间,但是对于膜上的靶蛋白也没影响。
部分文献展示:
1)Liu, C., Xu, Y., Yang, G., Tao, Y., Chang, J., Wang, S., ... & Zeng, Y. Niche Inflammatory Signal Regulates Periodical Mammary Regeneration and Safeguards Stem Cell Survival Under Cytotoxic Stress. Available at SSRN 4431123.(IF 25.269)
2)Liu, C., Xu, Y., Yang, G., Tao, Y., Chang, J., Wang, S., ... & Zeng, Y. A. (2024). Niche inflammatory signals control oscillating mammary regeneration and protect stem cells from cytotoxic stress. Cell Stem Cell, 31(1), 89-105.(IF 23.9)
3)Hao K, Chen Y, Yan X, et al. Cilia locally synthesize proteins to sustain their ultrastructure and functions[J]. Nature communications, 2021, 12(1): 1-16.(IF 17.694)
4)Ma, J. C., Luo, T., Feng, B., Huang, Z., Zhang, Y., Huang, H., ... & Cui, Z. K. (2023). Exploring the translational potential of PLGA nanoparticles for intra-articular rapamycin delivery in osteoarthritis therapy. Journal of Nanobiotechnology, 21(1), 361.(IF 10.2)
5)Liu, F., Zhang, X., Peng, Y., Zhang, L., Yu, Y., Hua, P., ... & Zhang, L. (2021). miR-24 controls the regenerative competence of hair follicle progenitors by targeting Plk3. Cell Reports, 35(10), 109225.(IF 9.423)