大家可能经常
看到别人文章的荧光图
又清晰又好看!
自己拍的分辨率却
让人头大!
别人用的是
又贵又高级的共聚焦!
而自己只能用
便宜的普通显微镜!
那么,有没有
既便宜分辨率又高清的方法呢?
小伙伴们,小雅今天就给大家带来一款”逆天改命”的新产品,
让您的普通荧光显微镜
拍出直追共聚焦的效果
成为“别人家的小孩”!
它就是基于
膨胀显微成像技术开发的——
这款神器可将样本在三维方向均匀的放大4.5倍左右,相应的空间分辨率也能提高4倍左右。例如﹐可将普通宽场显微镜250nm左右的分辩率提高到约90nm,共聚焦显微镜120nm左右的分辨率提高到约50nm。
那什么是膨胀显微成像技术(expansion microscopy,ExM)呢?
故名思义,肯定跟膨胀有关。其主要原理就是:将生物样本包埋在一种特殊的多聚物网络中,在多聚物吸水后,样本可以随着多聚物的膨胀而跟着膨胀。样本中的生物分子与多聚物形成共价键,生物分子被牢牢的锚定在聚合物网络上。多聚物的膨胀在空间上是均匀的,因此最终膨胀后样本中的生物分子的空间位置关系几乎不会发生改变。
膨胀显微技术作为一种新兴的超分辨率成像技术,不仅为生物学和医学研究提供了强大的工具,也为未来的技术发展开辟了新的道路。
ZX101正是基于此技术开发,
适用于细胞爬片免疫荧光实验,
其优点如下:
操作视频
显著提高荧光成像分辨率
ZX101可以将普通荧光显微镜的分辨率提升到共聚焦水平。
HeLa细胞爬片进行HSP60(绿)和α-tubulin(红)的免疫荧光染色。
抗体分别为Anti-HSP60 Rabbit pAb(货号:P900009)和Anti-α-tubulin Mouse mAb(货号:LF209)。
共聚焦荧光显微镜(Nikon CSU-W1)和普通荧光显微镜(OLYMPUS CKX53SF 40)拍摄图片。获得的图片经过软件ImageJ反卷积处理。
a.
细胞模式图表示胞内微管与线粒体的分布。HSP60定位于线粒体的基质。α-tubulin定位于微管;
b.
共聚焦荧光显微镜拍摄正常处理的HeLa细胞;
c.
普通荧光显微镜拍摄膨胀后的HeLa细胞。
综上,与非膨胀的HeLa细胞的共聚焦照片相比,膨胀的HeLa细胞的普通荧光显微镜照片中展现的线粒体和微管的清晰度更高。因此,在缺乏高分辨荧光显微镜的情况下,使用ZX101可在普通荧光显微镜下获得高分辨的图像。
图二
ZX101可以提高共聚焦成像的分辨率。
HeLa细胞爬片进行HSP60(绿)和α-tubulin(红)的免疫荧光染色,抗体同图一。
共聚焦荧光显微镜(Nikon CSU-W1)拍摄图片。获得的图片经过软件ImageJ反卷积处理。
a.
共聚焦拍摄正常处理的HeLa细胞;
b.
共聚焦拍摄膨胀后的HeLa细胞。
综上,与非膨胀的样本相比,膨胀后的样本展现的线粒体和微管的清晰度更高。因此,使用ZX101可进一步提高共聚焦成像的分辨率。
让蛋白共定位分析更准确
综上,由于普通荧光显微镜的分辨率低,误将正常样本的HSP60和α-tubulin展现为共定位关系。使用本产品可使细胞样本膨胀放大四倍左右,空间分辨率得到四倍左右提升,展现了HSP60与α-tubulin的真实定位关系(即非共定位)。
图四
ZO-1与Claudin-1共定位于细胞。
HeLa细胞爬片进行ZO-1(绿)和Claudin-1(红)的免疫荧光染色。
抗体分别为Anti-ZO-1 Mouse mAb(货号:M900002)和Anti-Claudin 1 Rabbit mAb(货号:R014053)。
普通荧光显微镜(OLYMPUS CKX53SF 40)拍摄图片。获得的图片经过软件ImageJ反卷积处理。
a.
模式图表示对样本同一视野进行膨胀前后拍摄;
b.
普通荧光显微镜拍摄正常处理的HeLa细胞;
c.
分析沿图b中白色虚线的ZO-1及Claudin-1 的荧光值分布;
d.
普通荧光显微镜拍摄HeLa膨胀处理的凝胶样本;
e.
分析沿图d中白色虚线ZO-1及Claudin-1 的荧光值分布。
综上,使用本产品可使细胞样本在空间中得到均匀的膨胀,不影响真实的ZO-1与Claudin-1 的共定位关系。
产品信息
货号 | 名称 | 规格 | 价格 |
ZX101 | 膨胀显微试剂盒 | 20次 | 338元 |
ZX101L | 100次 | 1380元 |
雅酶膨胀胶试剂盒拍摄指南&QA合集:http://www.ny-bio.com/cn/nd.jsp?id=1916&id=1916
雅酶:膨胀显微试剂盒操作指南:http://www.ny-bio.com/cn/nd.jsp?id=1917&id=1917