细胞虐我千百遍,我待细胞如初恋 |
1、细胞培养前,仔细观察细胞特点,包括细胞正常生长的状态图、传代、培养基类型等。 |
2、对于娇弱的细胞,就得细心呵护了,胰酶消化不能过久,吹的时候要轻柔,离心时也要注意转速和时间,每天都要去看一下细胞,肉眼观察培养基状况,显微镜观察细胞生长状态。 |
3、细胞传代一定要有规律,保持相同的细胞覆盖情况和传代时间间隔,不要随心所欲或者拖延。 |
4、动作要快,胰酶消化、换液等,细胞暴露在空气中的时间越短越好。另外,掌握好胰酶消化时间,所谓的细胞状态差,很多时候是传代的原因。 |
5、冻存细胞复苏后第二天最好更换一次培养基。 |
6、培养基更换时间,不同细胞类型不同,早了浪费试剂,晚了可能全军覆没。 |
7、培养箱隔一段时间彻底用酒精棉擦洗一次。切记注意定期更换通气过滤器。 |
8、生物安全柜、枪头、血清移液管、血清、培养基等都要保证足够好,并且细胞培养室要有良好的卫生措施,且不违法操作时,很难让细胞污染。 |
9、实验时所用材料的位置摆放要顺手,污染源和已灭菌物品要分开放置。
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10、发现有污染迅速出来掉,特别是当你养了很多细胞时,细胞污染、真菌污染很容易发现。支原体污染的话,细胞会长的慢,最好有支原体检测试剂盒定期检测。 |
养好细胞重中之重,暨最大的教训是:“不能偷懒!” |