分子克隆是分子生物学工作流程的关键组成部分,其可用于组装重组 DNA 分子并指导其复制。在分子克隆工作流程中,待克隆的 DNA 经过鉴定,并用酶对其进行处理以产生 DNA 片段。然后将这些片段与载体 DNA 组合以产生重组 DNA 分子。
一、CloneJET PCR Cloning Kit——适用于各种类型DNA片段的通用克隆试剂盒:灵活、创新、快速
产品简介
Thermo Scientific CloneJET PCR 克隆试剂盒是一款多功能的阳性克隆筛选系统,可高效克隆任何 PCR 产物。只需五分钟即可连接至阳性筛选载体,并获得超过99%的重组克隆。实验室常用的 E.coli菌株都可用该连接产物直接进行转化。
产品特点
• 快捷——可在短短5分钟内克隆 PCR 产物
• 多功能性——适用于磷酸化或非磷酸化 的DNA 片段,以及平末端和粘性末端 PCR 产物
• 高效——可获得超过99%的阳性重组克隆,且无克隆背景
• 经济——无需昂贵的蓝白斑筛选
• 兼容性强——可直接转化进常用 E. coli 菌株,包括 TOP10 和 XL1-Blue
产品列表
货号 | 产品名称 | 规格 | 单价 |
CloneJET™ PCR Cloning Kit | 20 rxn | 1,664 | |
CloneJET™ PCR Cloning Kit | 40 rxn | 3,114 |
阳性克隆筛选原理
pJET1.2/blunt 载体携带一个致死性限制性酶基因,此基因在 DNA 片段插入克隆位点后即被破坏。因此,只有含重组质粒的细菌细胞才能生长形成菌落。如果 pJET1.2/blunt 载体在没有片段插入的情况下重新环化,会表达致死性限制性酶,其在转化后杀死宿主 E. coli 细胞。这种阳性筛选大大加快了菌落筛选的进程,节省了蓝白斑筛选所需的额外成本。
为了便于对插入片段进行鉴定和后续处理,pJET 1.2/blunt 载体的多克隆位点包含两个 BgIII 识别序列,横跨插入位点两端。此外,载体含有用于 in vitro 和 in vivo转录以及插入片段测序的 T7 启动子。
二、不依赖连接酶的克隆试剂盒
产品简介
Thermo Scientifific™ aLICator™ 不依赖连接酶克隆和表达系统可实现快速高效的克隆,无需连接,且可随后在大肠杆菌中进行严格的基因调控表达。其中的pLATE细菌表达载体适用于目的蛋白的高水平表达,基础 (非诱导) 表达水平极低。
产品特点
• 无需采用传统方法酶切和连接DNA
• 严格调控蛋白质生成
• 一步法去除His-标签
产品列表
货号 | 产品名称 | 载体 | 规格 | 单价 |
aLICator™ LIC Cloning and Expression Kit 1 (untagged) | pLATE 11 | 20 rxn | 2591 | |
aLICator™ LIC Cloning and Expression Kit 2 (N-terminal His-tag/EK) | pLATE 51 | 20 rxn | 2590 | |
aLICator™ LIC Cloning and Expression Kit 3 (C-terminal His-tag) | pLATE 31 | 20 rxn | 2600 | |
aLICator™ LIC Cloning and Expression Kit 4 (N-terminal His-tag/WQ) | pLATE 52 | 20 rxn | 2309 | |
aLICator™ LIC Cloning and Expression Set 1 (All-in-One/EK) | pLATE 11, 31, & 51 | 30 rxn | 3303 | |
aLICator™ LIC Cloning and Expression Set 2 (All-in-One/WQ) | pLATE 11, 31, & 52 | 30 rxn | 2817 | |
WELQut Protease | 500 units | 500 units | 1415 |
三、用于DNA连接和末端修复的试剂盒
产品简介
Thermo Scientifific™ 快速DNA连接试剂盒可实现粘性末端或平末端DNA的快速连接,室温下只需5分钟。快速连接效率相当于T4 DNA连接酶标准1小时连接的效率。反应混合物可直接用于细菌转化。
Thermo Scientifific™ 快速DNA末端修复试剂盒可用于DNA末端的平端化和磷酸化,只需5分钟。
产品列表:
货号 | 产品名称 | 规格 | 单价 |
Rapid DNA Ligation Kit | 50 rxn | 1,793 | |
Rapid DNA Ligation Kit | 150 rxn | 3,378 | |
Fast DNA End Repair Kit (New av. as of 03-02-2011) | 250 prep | 2,287 |
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雅酶 | 即用型LB液体培养基(氨苄抗生素) | BML001 | 3mL×32支 | 68 |
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