技术专栏
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技术资料:ELISA技术‍简介‍:http://www.ny-bio.com/cn/nd.jsp?id=488&id=488ELISA样本制备和收集指南:http://www.ny-bio.com/cn/nd.jsp?id=489&id=489‍细胞因子概述:http://www.ny-bio.com/cn/nd.jsp?id=487&id=487‍ELISA实验常见问题及解析:http:/...
缓冲液是一种可以抵抗溶液中因加入少量酸、碱而产生的pH变化的液体。一般由弱酸及其弱酸盐或者弱碱及其弱碱盐配制而成。生物的生化反应,很多都需要一个稳定pH环境才能发生,比如血液就是一种缓冲体系。除了pH会影响生化反应效率外,缓冲液中的某些离子也可能会产生一些不必要的反应,妨碍目标实验的正常进行。因此在生命科学领域的实验中,研究者们需要慎重地选择缓冲体系。本期就为大家整理一些常用缓冲液的配制方法...
细胞培养基是细胞培养中不可缺少的营养成分,但是最基础的培养基却给很多实验者带来了一系列的问题。如果细胞状态不好,后续试验将无法进行,甚至前功尽弃。 培养基常见问题 一、如何选用培养基? 选择培养基没有一定标准,有几点建议可供参考:1. 建立某种细胞株所用的培养基应该是培养这种细胞首选的培养基。可以查阅文献,或在购买细胞株时咨询。2. 根据细胞株的特点、实验的需要来选择培养基。...
细胞培养基是动物细胞培养中不可缺少的部分,但是培养基的种类很多,对于不同的细胞类型及其研究目的,采用合适的培养基进行细胞培养才能起到很好的效果。下边介绍一些常用细胞的推荐种类供您参考。哺乳动物细胞常见类型及培养基种类细胞系细胞类型物种组织培养基293成纤维细胞人胚肾MEM and 10%FBS3T6成纤维细胞小鼠胚胎DMEM and 10%FBSA549上皮细胞人肺癌F-12K and 10...
细胞培养体外培养(in vitro):原意为在试管中,现常与组织培养一词通用,译为体外培养。组织培养(tissue culture):维持组织在体外生长、与泛指体外培养。器官培养(organ culture):在体外维持器官、器官的部分或器官的原基生存和生长的方法。 * 细胞培养(cell culture):细胞(包括单个细胞)在体外条件下的生长称为细胞培养,在细胞培养中,细胞不再形成组织。...
正如人有喜怒哀乐,细胞也是如此,细胞的活力和状态是不断变化的,而非一成不变的。在细胞体外培养的过程中,离开机体保护的细胞是很脆弱的,在陌生的生长环境下即便是培养条件的轻微改变,也可能对细胞产生无法预估的影响。在原代细胞培养过程中,即使保持培养条件完全一致,在传代过程中,细胞的存活质量也是逐渐下降的。以人脐静脉内皮细胞(HUVEC细胞)为例,HUVEC细胞是研究内皮细胞功能的经典体外细胞模型。...
前言细胞培养市场上有不同品牌,不同种类的基础培养基,但是其配方都是大同小异,都含有几种相同的重要组分,那么我们逐一说明。1、葡萄糖•葡萄糖浓度代表什么?•培养基中的葡萄糖浓度范围从1g/L(5.5mM)到10g/L(55mM)•5.5mM的葡萄糖浓度与体内正常血糖的浓度类似•高糖培养基可以满足肿瘤细胞等非生理状态细胞的体外培养需求•选择高糖还是低糖培养基?•根据不同细胞类型选择通常原代细胞、...
常规转染技术可分为两大类,一类是瞬时转染,一类是稳定转染(永久转染)。前者外源 DNA /RNA不整合到宿主染色体中,因此一个宿主细胞中可存在多个拷贝数,产生高水平的表达,但通常只持续几天,多用于启动子和其它调控元件的分析。一般来说,超螺旋质粒DNA转染效率较高,在转染后24-72小时内(依赖于各种不同的构建)分析结果,常常用到一些报告系统如荧光蛋白、β半乳糖苷酶等来帮助检测。后者也称稳定转...
培养基是细胞培养中不可缺少的营养成分,但是最基础的培养基却给很多实验者带来了一系列的问题。如果细胞状态不好,后续试验将无法进行,甚至前功尽弃。 培养基常见问题一、如何选用培养基? 选择培养基没有一定标准,有几点建议可供参考: 1. 建立某种细胞株所用的培养基应该是培养这种细胞首选的培养基。可以查阅文献,或在购买细胞株时咨询。 2. 根据细胞株的特点、实验的需要来选择培养基。如小鼠...
细胞消化说不上是细胞培养成功的关键所在,但也是细胞培养成功的因素之一。因此,对于细胞消化,有经验的专家学者总结如下: 1. 绝大部分细胞消化的时候是只要用胰酶润洗一遍即可。吸去胰酶后,残留的那些无法计算体积的附着在细胞表面的微量胰酶在37℃一般不到2min足够消化细胞(绝大部分1min不到)。对于这些细胞原则上不要用胰酶孵育细胞,连续这样传代,对细胞伤害很大。简单的程序是PBS润洗吸去,胰酶...
细胞培养过程中,有多虐心就有多少需要注意的地方。作为生物学研究最基础的技术之一,细胞培养可以说渗透生命科学研究的方方面面。下面就将胎牛血清的作用、选择及保存、冻融方法介绍给大家。血清及其作用血清,在血浆中除去纤维蛋白分离出的淡黄色透明液体或指纤维蛋白已被除去的血浆。其主要作用:一、血清提供:营养和能量来源;生长和粘附因子;肽和类固醇激素;载体蛋白;二、保护细胞:免受蛋白酶、毒性物质、PH值波...
如何获得更好的细胞培养效果•保证良好的细胞培养环境•选择合适的培养体系,争取配制和保存培养基•注意传代时间,密度和解离操作•及时冻存细胞,注意冻存和复苏操作良好的细胞培养环境 无菌技术•污染的来源非无菌物品、培养基和试剂、带有微生物的空气颗粒、不干净的培养箱和污染的工作台面•无菌技术通过一套操作流程降低培养物被上述污染源污染的可能•无菌技术组成要素无菌工作区域无菌操作无菌试剂和培养基良好的个...
培养基是细胞培养中不可缺少的营养成分,但是最基础的培养基却给实验者带来了一系列的问题。别小看细胞培养,这里可蕴含着大学问。下面做详细综述:培养基及其作用培养基(Medium)是供微生物、植物和动物细胞生长和维持用的人工配制的养料。一般都含有碳水化合物(糖)、氨基酸,无机盐(包括微量元素)以及维生素和水等。细胞培养液=基础培养基+10%FBS+营养添加剂+抗生素培养基种类经典的培养基有很多种,...
马上放假了,我的细胞正培养着呢,怎么办?细胞生长旺盛,传代次数多了,目前用不了这么多,又不想舍弃,怎么办?那么这时候,我们需要把细胞冷冻起来,以便于长期保存,以备不时之需。而复苏,就是再次使用细胞时,使冷冻的细胞苏醒过来,恢复活力。冻存细胞一般常用胎牛血清(FBS)和二甲基亚砜(DMSO)。血清是维持细胞生存环境;DMSO是冷冻保护剂,使细胞免受低温冰晶形成、及渗透压改变而导致的物理损伤;细...
老子说:治大国如烹小鲜。我们说:待细胞如养熊猫。如何养细胞?牢记“十不要”1、像了解你的孩子一样了解你的细胞,养着他并爱着他,不要粗鲁对待。 2、细胞培养所有的试剂不要说我就用最好的,别人眼中的最好未免会适合你的细胞的生长,选最合适的最重要。 3、细胞房不要一次性进去太多人,避免相互干扰。 4、操作时间尽量短,操作步骤尽量少。不要没有做好合理的安排,操作过程杂论无章、手足无措。 5、身体的各...
细胞虐我千百遍,我待细胞如初恋 1、细胞培养前,仔细观察细胞特点,包括细胞正常生长的状态图、传代、培养基类型等。 2、对于娇弱的细胞,就得细心呵护了,胰酶消化不能过久,吹的时候要轻柔,离心时也要注意转速和时间,每天都要去看一下细胞,肉眼观察培养基状况,显微镜观察细胞生长状态。 3、细胞传代一定要有规律,保持相同的细胞覆盖情况和传代时间间隔,不要随心所欲或者拖延。 4、动作要快,胰酶消化、换液...
全心全意做细胞培养相关产品,致力服务于生命科学基础研究与应用领域。赛澳美细胞技术(北京)有限公司今天将同大家一起来了解一下神奇的细胞学实验技术~看看我们一直关注的各种小细胞究竟在基础科学研究领域默默地发挥着什么样的作用,今天我们介绍的细胞学实验技术主要包括以下方面啦01细胞培养细胞培养也叫细胞克隆技术,在生物学中的正规名词为细胞培养技术。细胞培养技术可以由一个细胞经过大量培养成为简单的单细胞...
上期,给大家简单介绍了细胞学相关技术,从这期开始,我们将分别为大家详细介绍各种细胞学相关的实验技术。秉持“少即是得”的原则,我们预定每一期只详细介绍一种技术,最终都汇集在CellMax细胞大课堂,为大家尽可能地提供方便。大家也可以在下方留言版块写下最希望了解的技术或者贡献您的宝贵意见,我们将为大家精心准备您想知道的一切~这一期,我们将为大家介绍的是手工细胞计数法。因为在细胞培养技术中,细胞计...
摘要慢病毒载体(LV)在获得性及遗传性疾病的基因治疗中的应用越来越广泛。这篇综述介绍了生产这些载体最前沿的技术,尤其是涉及到临床应用的大规模生产技术。相比较于在稳定细胞系生产的逆转录病毒载体,临床级别的慢病毒大多是通过在细胞工厂瞬时转染293或293T细胞生产的。这篇综述比较了已发表的慢病毒大规模生产和纯化工艺并介绍了它们的优缺点。此外,稳定细胞系领域的进展及它们作为临床材料生产载体的进展也...