Phos-tag™ 凝胶荧光染料，是一种可在生理pH范围内，对凝胶中的磷酸化蛋白进行染色的荧光染料。进行了SDS-PAGE，用本产品处理聚丙烯酰胺凝胶，可以对磷酸化蛋白进行特异性染色。

本系列有波长不同的 Yellow（黄）、Magenta（品红）、Cyan（蓝绿）、Aqua（浅绿）四种颜色。每管规格为 0.2 mg，可对约20个迷你凝胶进行染色。

※使用Phos-tag^™ 凝胶荧光染料，需要用到 Mixed reagents for Phos-tag™ Common Solution 5×（产品编号：383-15231），请一同购买。

◆特点

● 高灵敏度

● 在生理pH下即可染色

● 选择性与pSer、 pTyr、 pHis以及pAsp残基结合

● 无需放射性物质、化学物质标签、抗体

● 2小时内完成染色

◆产品对比

◆应用实例①

磷酸化蛋白与非磷酸化蛋白的染色 Phos-tag™ Aqua（浅绿）

Lane.No.（）内为磷酸基团数目

Phos-tag™ Aqua（浅绿）染料选择性：用Phos-tag™ Aqua（浅绿）对10％（w/v）的PAGE胶进行染色，其中分别含有四组完整的以及经ALP（碱性磷酸酶）处理的磷酸蛋白（α-酪蛋白，β-酪蛋白，卵清蛋白和胃蛋白酶各1 μg）（左），然后使用考马斯亮蓝CBB G-250染色（右）。

成功特异性地检测出SDS-PAGE后的磷酸化蛋白。

数据提供：广岛大学研究生院 医学系科学研究科 医药分子机能科学研究室 木下惠美子老师、木下英司老师、小池透老师

◆应用实例②

使用Phos-tag™ 荧光凝胶染料的组氨酸、天门冬氨酸的磷酸化分析

细菌通过将信息从组氨酸激酶EnvZ传递到应答调控子OmpR来调节基因的表达。分别分析有自磷酸化能力的EnvZ激酶和被EnvZ催化的OmpR中组氨酸和天门冬氨酸的磷酸化。

可以确认Phos-tag™ Magenta（品红）和Phos-tag™ SDS-PAGE 这两种试剂中的His和Asp的磷酸化随激酶的处理时间经过不断增强。尤其是使用Phos-tag™ Magenta（品红）时，可以仅检测出His磷酸化或Asp磷酸化。

数据提供：广岛大学研究生院 医学系科学研究科 医药分子机能科学研究室 木下惠美子老师、木下英司老师、小池透老师

◆应用实例③

用于筛选组氨酸激酶抑制剂（新型抗生素）

使用Phos-tag™荧光凝胶染料，筛选组氨酸激酶抑制剂。

证实磷酸化依赖组氨酸激酶抑制剂浓度被抑制。

数据提供：广岛大学研究生院 医学系科学研究科 医药分子机能科学研究室 木下惠美子老师、木下英司老师、小池透老师

参考文献

“Quantitativemonitoring of His and Asp phosphorylation in a bacterial signaling system byusing Phos-tag Magenta/Cyan fluorescent dyes”, Emiko Kinoshita-Kikuta, HiroshiKusamoto, Syogo Ono, Keisuke Akayama, Yoko Eguchi, Masayuki Igarashi, ToshihideOkajima, Ryutaro Utsumi, Eiji Kinoshita, Tohru Koike, Electrophoresis, 2019

◆使用方法

※调整平衡及清洗溶液以及染色溶液必须使用Mixed reagents for Phos-tag™ Common Solution 5× (产品编号：383-15231)。

◆激发波长/荧光波长

Phos-tag™ Yellow（黄）

Ex/Em=505 nm/514 nm

Phos-tag™ Magenta（品红）

Ex/Em=547 nm/561 nm

Phos-tag™ Cyan（蓝绿）

Ex/Em=643 nm/661nm

Phos-tag™ Aqua（浅绿）

Ex/Em=551 nm/564 nm