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‍【雅酶】PAGE凝胶快速制备试剂盒‍说明书【下载‍】‍

产品说明

本产品常温运输；保存于 4℃，其中 改良型促凝剂 保存于-20℃，保质期 12个月。

产品内容

产品简介

本产品采用上层胶和下层胶的预混配方，只需加入 改良型促凝剂 即可凝胶，简便快捷。所配的上层胶带有颜色（红色、蓝色或绿色），点样孔清晰易辨，方便点样。三种颜色设计，可用于区分含不同样品的凝胶。本试剂盒灌制的凝胶也可用于非变性PAGE凝胶电泳。

本产品配套提供 改良型促凝剂 ，其具有更好的稳定性和催化效能，配胶过程中无需额外添加TEMED。为方便吸取使用，已开盖使用中的改良型促凝剂可置于4℃保存至少三个月。

操作视频

操作视频-剥离胶

制胶流程

（以一块 0.75/1.0/1.5 mm 的mini胶为例）

1. 取等体积 下层胶溶液 和 下层胶缓冲液 ，各 2.0/2.7/4.0mL，混匀；

2. 向步骤1的混合溶液中加入 40/60/80μL 的 改良型促凝剂 ，混匀；

3. 将步骤2的混合溶液注入制胶玻璃板中，使液面和短玻璃板上沿之间的距离比梳齿长0.5 cm即可

   （注意：此溶液为过量，请勿全部注入，可留少许于配胶杯中，以判断胶凝固状况)，加入适量水或醇（如异丙醇、正丁醇等）覆盖于下层胶之上；

4. 待下层胶凝固后(约5~10 min)，倒去上层水或醇；注意：当水(醇)和胶之间有一条折射线时，说明胶已凝固。

5. 取等体积 上层胶溶液 和 彩色上层胶缓冲液 ，各 0.5/0.75/1.0mL，混匀；注意：由于染料的特殊理化性质，使用前请摇匀。

6. 向步骤5的混合溶液中加入 10/15/20μL 的 改良型促凝剂 ，混匀；

7. 将步骤6的混合溶液注入制胶玻璃板中，插入梳齿；

8. 待上层胶凝固后(约10~15 min)，拔去梳齿即可用于电泳。注意：请尽量使用新鲜配制的电泳缓冲液。

注意事项

1. 本产品制备出的凝胶其上层胶对样品没有浓缩效应，与预制胶类似，但与传统PAGE胶相比，对蛋白条带分离效果更好，小分子量蛋白(比如10 kDa)也可以清晰地分离开，且蛋白条带更窄更锐利；

2. 改良型促凝剂的使用量仅作参考，实际用量可根据个人实验习惯和经验调整。加入较多量的促凝剂可加速凝胶，反之亦然；

3. 凝胶速度与温度有显著的正相关性。同等条件下，温度越高，凝胶速度越快，室温过高时建议适当减小改良型促凝剂的用量；相反，如果室温较低，可适当延长凝胶时间；

4. 本产品已加入适量TEMED的替代品，如需进一步加速凝胶，临配胶前可按需补充适量TEMED；

5. 在配胶之前，使胶溶液及缓冲液平衡到室温(如室温放置几分钟)，可有效避免凝胶中气泡的形成；

6. 推荐电泳条件为：150V，约50 min(或200V，约35 min)；

7. 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作；

8. 本产品仅限科研使用。

凝胶浓度选择参考

• 以上为Tris-Glycine缓冲系统中，三色蛋白分子量标准(货号：WJ103)在不同浓度SDS-PAGE凝胶中的电泳示意图

• 共包含11条蛋白条带(10kDa，15kDa，20kDa，25kDa，35kDa，40kDa，50kDa，70kDa，100kDa，150kDa，250kDa)

• 此图仅供参考，因温度和pH值等不同，具体情况可能会有所出入。