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产品简介：

       雅酶免分装快速细胞冻存液（无血清）是一种新型无血清快速细胞冻存液，冻存细胞可在-80℃长期保存（>5年），能够有效提高细胞 冻存活率和复苏活力，不含血清，可减少各类病毒、细菌、霉菌和支原体等污染，保证冻存细胞的安全。 此外，该产品为 5mL×20 的包装，无需分装，即取即用，既适用于一般培养细胞的冻存，也适用于无血清 培养细胞的冻存。

产品特点：

※ 省时省力——直接存放于-80℃冰箱冻存，无需程序降温；
※ 安全性高——无血清，化学成分明确；
※ 高 品 质——细胞复苏率在90%以上；
※ 使用方便——无需分装，2 ~ 8℃即可稳定保存，无需冷冻，即取即用。

细胞冻存案例： （已验证过多种细胞，让细胞宝宝更健康！）

A431（人皮肤基底细胞癌）、LOVO（人结肠癌细胞）、Jecket、 MH-s（肺泡巨噬细胞）、THP1 人单核细胞型淋巴瘤、PBMC 、HTR-8、tccsup、293T、293FT、HCT-8、RPTEC、L-WRN、MRC-5、huh7、lm6、MCF-7、MDA-MB-231、MV4-11、MOLM-13、U937、HL60、TG-1、BaF3、32D、牙齿干细胞、英文名是stem cells from apical papilla 、h460、bxpc3、panc1、patu8988、cfpac1。aspc1（人转移胰腺癌细胞） 人的外周血细胞、单核细胞、淋巴细胞、中性粒细胞、monocyte（单核细胞）、Neutrofile、MEF、B16、Hela、HepG2（人肝癌细胞）、RKO（人低分化的结肠癌细胞）、HCT116（人结肠癌肿瘤细胞）、N2A（Neuro-2a小鼠来源神经瘤母细胞）、脂肪细胞、3T3-L1（小鼠胚胎成纤维细胞）、REH（人急性淋巴细胞性白血病细胞）、NALM6（人急性B淋巴白血病悬浮细胞系）、HCC827、H1975（人非小细胞肺癌腺癌细胞）、lymphocyte（淋巴细胞）、H9C2（大鼠胚胎心肌细胞）、MSC（间充质干细胞）、MC3T3（成骨细胞）、人的成纤维细胞、normal fibroblast（正常成纤维细胞）、HT-29 corneal 、endothelial cell、角膜内皮细胞、HEP3B （人肝癌细胞）、SNU-387 （人肝癌细胞）、SNU-423（人肝癌细胞） 、HLE（人肝癌细胞） 、JHH-7（人肝癌细胞）、 A375 、A2058 （人皮肤癌细胞）、造血干细胞、胚胎干细胞、U879（人脑胶质母细胞瘤）、u251（人脑胶质瘤细胞）、Jurkat（Jurkat、Clone E6-1人T淋巴细胞白血病细胞）  、Raji、（Raji人Burkitts淋巴瘤细胞 ） 、K562（人类髓性白血病人工培养的细胞） 、M14（m14黑色素瘤细胞、m14皮肤细胞）、前列腺癌细胞、膀胱癌细胞、和HUVEC（人脐静脉内皮细胞）、NSC（神经干细胞）、Mdck（犬肾细胞）、Sh-sy5y（人神经母细胞瘤细胞）、Mg62、k7m2（小鼠骨肉瘤成骨细胞）、hos(人骨肉瘤细胞)、u20s(人成骨肉瘤细胞) 肝癌细胞几乎都养过、肝癌细胞几乎都冻过g2（人肝癌细胞)、m3 7721（人肝癌培养细胞）、97h（人高转移性肝癌细胞）、97L（人低转移肝癌细胞）、视网膜色素上皮细胞、视网膜周细胞、脐静脉内皮细胞肺腺癌细胞、H1650（细支气管肺泡癌）、PC9（人肺癌细胞）、胰腺癌细胞、miapaca2(人胰腺癌细胞)、panc1（人胰腺癌细胞） 、102;PLC（人肝癌亚力山大细胞）、PC12 S(神经细胞株);MLO-Y4 (小鼠骨样细胞) ;RAW264.7(单核巨噬细胞)MHCC97H(人高转移肝癌细胞);insy、caco2(人克隆结肠腺癌细胞);cho(转化细胞系) NIH3T3（小鼠胚胎成纤维细胞系）;4T1（410.4瘤株中未经诱变筛得的6-硫鸟嘌噙抗性细胞株）2215（ DNA转染细胞系）; HT29（人结肠癌细胞）;SW480（结肠癌细胞）;肺癌细胞、前列腺癌细胞、人膀胱癌细胞(EJ)、人膀胱移行细胞癌(J82)、人外周血淋巴细胞、人淋巴单核细胞淋巴单核细胞（LyMC）、lymphocyte 间充质干细胞（MSC)、人肺癌鳞状细胞(HCC-95)、人肺腺癌细胞(SPC-A-1)、人肺鳞癌细胞(NCI-H520)、人非小细胞肺癌细胞(A549)、人前列腺癌细胞(DU145)、大鼠心肌细胞H9C2、角膜内皮细胞、人急性早幼粒白血病细胞NB4、人膀胱癌细胞(T24)、人膀胱癌细胞(UMUC3)、人膀胱癌细胞(5637)、人子宫内膜癌细胞RL95-2(、人子宫内膜腺癌细胞HEC-1-A、人子宫内膜癌细胞ISK、人子宫颈癌细胞C-33A 、人关节软骨细胞（HC-a）、人克隆结肠腺癌细胞caco-2

操作步骤：

一、细胞冷冻步骤

1. 收集处于对数生长期贴壁细胞或悬浮细胞于离心管中，并进行细胞计数；
2. 取所需冻存细胞数的细胞悬浮液置于离心管中，离心收集细胞（参考离心条件：1,000 ~ 2,000 rpm，3 ~ 5 min）。彻底移去离心管中的上清液；
3. 加入适量的细胞冻存液于离心管中，调整细胞浓度至 1~5×106 cells/ml。轻柔混匀，制成细胞冻存悬液；
4. 将离心管中的细胞冻存悬液分装于已标示完全的冻存管中；
5. 直接将含细胞悬液的冻存管放入-80℃冰箱，长期冷冻保存；
6. 若需液氮保存，需放-80℃冰箱过夜后移至液氮罐。

二、细胞复苏步骤

1. 取出冻存的细胞，立即放入37℃水浴槽中快速解冻；
2. 待冻存管中细胞混合液完全融化后，立即移入含5 ml细胞培养基的离心管中，离心收集细胞（参考离心条件：1,000 ~ 2,000 rpm，3 ~ 5 min）；
3. 小心移去上清液。加入适量的新鲜细胞培养基，轻轻混匀，将细胞混合液移至事先准备好的培养容器中；
4. 镜检后，可根据具体研究需要及方法进行细胞常规培养。

三、注意事项
1. 冻存细胞分装后，应尽快移入-80℃冰箱；
2. 若需长期冻存细胞，请转移至液氮罐中贮存；
3. 冻存干细胞或原代细胞时，建议事先使用该产品对所冻存的细胞进行为期至少1周的预实验，确认性能后再进行正式冻存；
4. 冻存液中含有DMSO成分，为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作；
5. 本产品仅限科研使用。

相关产品列表：

附：传统冻存方法相关产品：

传统的细胞冻存遵循缓冻速融原则，细胞+DMSO+血清，然后-4度30分钟—— -20度1-2小时—— -80度过夜——沉入液氮，或者使用程序降温盒。

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无血清冻存液冻存细胞相比自配冻存液冻存的区别（优势）

自配冻存液：

大约70%是用血清加DMSO冻存细胞。血清的比例有很多种，例如10%血清加80%培养基+10%DMSO，或者20%血清、30%血清、40%血清、50%血清、甚至90%血清，注意DMSO全是10%的比例。基本上需要用到用程序冻存盒冻存。

使用层面：

程序冻存盒可以回收用，但重复使用还需要间隔1小时以上。而且程序冻存盒刚从低温冰箱拿出来，很难打开盖子且需要戴防护手套。别人在冻存细胞就无法同时使用，基本上需要用到用程序冻存盒冻存，（部分不用程序冻存盒，直接放-80度，后续是转到液氮。另外一部分是用计时器挨个计时，从4度到-20度，再到-80度，后续是转到液氮）。

安全层面：

程序冻存盒要往里面加异丙醇，是管制试剂属于有毒品。

价格成本：

程序冻存盒可以回收用，但不便宜。自配冻存液需要血清，现在市面上血清的价格也比较贵，此外细胞级别的DMSO也比较贵，很多客户都用Sigma的DMSO，100ml，要1000多元。算下来自己配冻存液的成本基本都比雅酶无血清细胞冻存液贵。异丙醇基本每周都要更换一次，每次都有损耗和浪费，这一项估计要有2000元的维护成本。

客户QA

Q：自己配冻存液冻存，效果也还可以。不敢换体系，担心细胞出了问题，后面没法开展实验。

A：目前市面上卖细胞的公司几乎都用的是无血清冻存液。因为公司更要考虑成本和批次稳定性，所以几乎都选择无血清冻存液。雅酶给几家卖细胞的公司提供冻存液。冻存细胞系完全没有问题。（原代细胞或者干细胞担心效果，可以拿试用装短时间测试一下，可以和自配冻存液同时对比，冻存一两周或者1个月复苏看效果。）

Q：每次冻存细胞需要用多少冻存液？

A：细胞浓度是1~5×106cells/mL，（用雅酶冻存液和自己用组分配的冻存液，是一样的细胞浓度）

Q：客户问用雅酶冻存液，细胞放入液氮罐，是否需要先在﹣80度过夜？

A：必须先在﹣80度过夜，第二天再放入液氮罐，不可以直接放入液氮罐，（客户自己用组分配冻存液，也是这样的），我们说明书也有写清楚。

Q：客户问用雅酶冻存液，细胞放在﹣80度，可以保存多久？

A：长期保存（>5年）