·PVDF膜 ·
·NC膜 ·
如上图所示,以较难剥离的GAPDH抗体为例,咱们先将A431细胞裂解液(总蛋白量分别为2.5μg、1.25μg、0.62μg、0.31μg)通过SDS-PAGE电泳分离后,分别转印至PVDF膜和NC膜上,使用雅酶无蛋白快速封闭液(PS108P)封闭后,孵育GAPDH兔单克隆抗体(LF211)后进行ECL发光初次检测。
初次检后,将转印膜裁切成两部分,分别使用雅酶PS107和某进口大牌抗体剥离液孵育15min。
抗体剥离处理后,用1×PBST洗涤转印膜,并进行ECL发光成像。
最后,将转印膜重新封闭,并孵育HSP60兔多克隆抗体(P900009),进行ECL发光二次检测。
结论:对于较难剥离的GAPDH抗体,雅酶PS107表现明显优于某进口大牌抗体剥离液。
·PVDF膜 ·
·NC膜 ·
如上图所示,这次将Hela细胞裂解液(总蛋白量分别为2.5μg、1.25μg、0.62μg、0.31μg)与GAPDH抗体孵育并进行初次检测。
初次检测完成后,将印迹膜裁切为两部分,分别使用某进口大牌抗体剥离液和雅酶PS107孵育6h。
抗体剥离处理后,用1×PBST洗涤转印膜,并进行ECL发光成像。
最后,将转印膜重新封闭,重新孵育GAPDH抗体,进行ECL发光二次检测。
结论:经过抗体剥离液6h的孵育,在PVDF膜上,两个品牌都将抗体剥离得很干净,且没有将目的蛋白剥离掉;在NC膜上,雅酶PS107同样表现出色,但某进口品牌无法将GAPDH充分剥离。
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1)Liu, C., Xu, Y., Yang, G., Tao, Y., Chang, J., Wang, S., ... & Zeng, Y. Niche Inflammatory Signal Regulates Periodical Mammary Regeneration and Safeguards Stem Cell Survival Under Cytotoxic Stress. Available at SSRN 4431123.(IF 25.269)
2)Liu, C., Xu, Y., Yang, G., Tao, Y., Chang, J., Wang, S., ... & Zeng, Y. A. (2024). Niche inflammatory signals control oscillating mammary regeneration and protect stem cells from cytotoxic stress. Cell Stem Cell, 31(1), 89-105.(IF 23.9)
3)Hao K, Chen Y, Yan X, et al. Cilia locally synthesize proteins to sustain their ultrastructure and functions[J]. Nature communications, 2021, 12(1): 1-16.(IF 17.694)
4)Ma, J. C., Luo, T., Feng, B., Huang, Z., Zhang, Y., Huang, H., ... & Cui, Z. K. (2023). Exploring the translational potential of PLGA nanoparticles for intra-articular rapamycin delivery in osteoarthritis therapy. Journal of Nanobiotechnology, 21(1), 361.(IF 10.2)
5)Liu, F., Zhang, X., Peng, Y., Zhang, L., Yu, Y., Hua, P., ... & Zhang, L. (2021). miR-24 controls the regenerative competence of hair follicle progenitors by targeting Plk3. Cell Reports, 35(10), 109225.(IF 9.423)