四正柏的新款的微量标记试剂盒进行了以下优化:
1、最佳投料比,针对不同的抗体量建议了最佳染料用量;
2、推出了更多种荧光,满足不同客户需求;
3、针对抗体识别抗原(胞内还是细胞表面)给出了不同的建议;
4、更贴心,提供了抗体和染料反应用的EP管及标记后抗体存放的避光螺帽管。
以下是部分测试和大家共享:
待标记抗体的浓度最佳浓度选定
待标记抗体的浓度与标记效果相关,以下待标记50μg Purified anti-human CD4(clone:4ARiv7)抗体,抗体分别选用0.1mg/ml,0.5mg/ml,1mg/ml 抗体浓度,分别用4AF647R-Antibody conjugation Kit/4AF647抗体标记试剂盒(Cat.APL008-100)和FITC-Antibody conjugation Kit/FITC抗体标记试剂盒(Cat.APL012-100)进行了标记,测试流式结果如下(图1和图2),可见待标记抗体的浓度直接关系到标记效果,建议待标记抗体的浓度为0.5mg/ml-1mg/ml为最佳。
游离荧光去除前后的结果对比
待标记抗体Purified anti-human CD4(clone:4ARiv7)识别细胞表面抗原,分别取了50μg浓度为 0.5mg/ml 的Purified anti-human CD4(clone:4ARiv7)抗体2支抗体,用FITC-Antibody conjμgation Kit / FITC抗体标记试剂盒(Cat.APL012-100)进行了标记,两种标记不同之处为:一支去除了游离荧光,一支未去除游离荧光,流式结果见图3-5。
结果:是否去除游离荧光并不影响流式测定,反而去除游离荧光强度不及未去除的,主要是因为标记后抗体用量是根据标记前抗体量进行计算(标记过程中损失未计),去除游离荧光反而荧光强度更低,推测主要是由于去除游离荧光造成损失导致,后续我们测定了标记抗体OD值,证明了推测的合理性。
苏州四正柏生物科技有限公司
拥有晶美生物、北京四正柏生物30多年的技术积累,现已成长为一家集生命科学研究、临床转化应用、流式技术服务、进出口平台四位一体的国家级高新技术企业。公司于2019年和2022年分别完成数千万元天使轮和Pre-A轮融资,拥有国家专利授权30余项,并承担国家科技部、北京市科委、深圳市科委等四项科研基金项目,获得苏州市高新区创业领军人才项目支持。公司已建成满足ISO9001:2015标准要求的全面质量管理体系,以及达到GMP规范要求的IVD生产线。公司已获医疗器械证200余件、欧盟CE认证2件。四正柏企业愿景是发展成为全球生命科学和临床诊断领域最具竞争力的高新技术企业之一,植根中国,服务中国,面向世界。